CPSA 2013分会:生物分析和新技术的发现

2013-5-03 12:42 来源: 分析测试百科
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  2013年4月26日,上海CPSA 2013各个分会在浦东淳大万丽酒店不同宴会厅同期举行。本次在宴会厅二的会议主要围绕生物分析和新技术的发现展开专题讨论。


中国科学院化学研究所聂宗秀老师

  首先上台演讲的是来自中国科学院化学研究所的聂宗秀老师,为大家作《采用MALDI-TOF质谱对体内小分子的分析》报告。报告先阐述了小分子研究背景和结构,并言明采用质谱对体内小分子分析可能遇到的挑战,包括在降低干扰和无损伤的前提下活体取样、由于不同生活环境而产生的耐盐性、高选择性等。而使用MALDI质谱分析则可以避免以上问题,MALDI在分析过程中不需要进行盐类分析,晶体盐会抑制或阻止激光解吸;由于基体干扰运行MALDI时其质量大于500Da;并可以利用其低电离效率进行糖组学分析。


赛默飞世尔科技聂爱英博士

  来自赛默飞世尔科技的聂爱英博士在生物分析技术开发分会场带来题为《高分辨质谱表征抗体药物分子量、肽序列和修饰位点》的报告。主要介绍了抗体药物、Orbitrap质谱仪和Q Exactive分析抗体药物的分子量、肽序列和修饰位点三个方面的内容。

  聂爱英博士以单克隆抗体MAb为例介绍了赛默飞Orbitrap仪器抗体检测的方法和优势。单克隆抗体MAb分子量约150k Da,有2个轻链和2个重链,多个二硫键,由多种糖形的糖蛋白组成。MAb有多重修饰方式,可以脱酰胺、氧化、二硫化、序列截断、聚合等。目前在MAb开发工作流程涉及了药物发现、临床前开发、临床开发、商品化前后的整个过程。MAb分析包括产品滴度、纯度和杂质、产品ID、完整质量序列、电荷变化、碎片、修饰、DMPK/代谢物和聚糖等,传统的分析方法有SDS-PAGE、HPLC、免疫组化分光光度法。传统方法在选择性、特异性、灵敏度、线性范围、通量和稳定性中存在很多挑战。

  Orbitrap成为MAb分析的一种突破性技术,其拥有高分辨率,可以达到140k FWHM@200 m/z和240k@400m/z;内标<1ppm和外标<2ppm的高精度;很好的正负极转换稳定性和高通量,一次进样获得更多信息;小于fmol的灵敏度。目前Orbitrap家族有落地式LTQ Orbitrap和台式Exactive两款产品。在售的LTQ Orbitrap系列有LTQ Orbitrap XL、LTQ Orbitrap Velos Pro、LTQ Orbitrap Elite。在售的Exactive系列有Exactive plus、Q Exactive。聂爱英博士详细介绍了Q Exactive定量分析MAb的工作流程和获得的原始MW、解卷积MW、ADC键位置、不同的PTM位点。使用Q Exactive可以获得大于95%的肽图谱信息。


Bristol-Myers Squibb公司Hong Cai女士

  最后来自Bristol-Myers Squibb公司的Hong Cai女士发表《在小分子HRMS和SWATH技术的定量和定性分析中的应用:优势和挑战》演说。演说从采用HRMS对小分子的定性和定量分析、SWATH技术、运用SWATH在生物环境中对小分子的定性定量分析、获得高质量SWATH关键因素这几方面展开。报告指出与HR-PIA相比,SWATH能够取代定量分析并可能有更高的灵敏度,同时SWATH也可以运用离子光谱过滤片段用于筛选未知物或代谢产物,SWATH也能适用于量化和大量物质成分结构鉴定,拥有广阔的应用前景,包括环境分析、农药残留和食品分析等。