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解决方案丨全自动样品净化浓缩仪-高效液相色谱法测定食品中苯并(a)芘的残留量
苯并(a)芘，是一种含苯环的稠环芳烃，英文缩写BaP。苯并(a)芘是已发现的200多种多环芳烃中最主要的环境和食品污染物，污染广泛且污染量大，致癌性强。食物在熏制、烘烤和煎炸过程中，脂肪、胆固醇、蛋白质和碳水化合物等在高温条件下会发生热裂解反应，再经过环化和聚合反应就能够形成包括苯并(a)芘在内的多环芳烃类物质，尤其是当食品在烟熏和烘烤过程中发生焦糊现象时，苯并(a)芘的生成量将会比普通食物增加10～20倍。因此对食品中的苯并(a)芘进行检测具有重要意义。
本文参考GB 5009.27-2016《食品安全国家标准 食品中苯并(a)芘的测定》中的前处理方法，采用睿科集团全自动样品净化浓缩仪SPEVA 08N实现一键对油脂样品中苯并(a)芘的自动净化、洗脱和浓缩，乙腈复溶，高效液相色谱检测，外标法定量。在1.0μg/kg的加标水平下，苯并(a)芘的回收率在88%-93%之间，RSD值小于5%，说明本方法可以满足油脂样品中苯并(a)芘残留量高效、准确的测定。
1仪器与耗材
1.1仪器
睿科集团SPEVA 08N全自动样品净化浓缩仪
Agilent 1260 Infinity II高效液相色谱仪
1.2耗材和试剂
苯并(a)芘分子印迹柱：500mg/6mL
正己烷（色谱纯）
二氯甲烷（色谱纯）
乙腈（色谱纯）
2样品制备
称取1g油脂样品于玻璃试管中，加入10ml正己烷，涡旋溶解0.5min，全部样品待过柱。
依次用15ml二氯甲烷和10ml正己烷活化小柱，将待净化液全部过柱，用6ml正己烷淋洗柱子，弃去流出液。最后用5ml二氯甲烷洗脱，洗脱液于40℃氮吹至近干，加1ml乙腈复溶，过膜后上高效液相色谱检测。具体方法如下所示。
全自动样品净化浓缩仪 | 睿科集团SPEVA 08N |
固相萃取柱 | 苯并(a)芘分子印迹柱：500 mg/6mL |
活化 | 二氯甲烷、正己烷 |
淋洗 | 正己烷 |
洗脱 | 二氯甲烷 |
图1.SPEVA 08N固相萃取净化方法
图2.SPEVA 08N浓缩方法
3检测条件
3.1液相条件
色谱柱 | Agilent eclipse XDB-C18 (4.6×250 mm,5.0 um) |
柱温 | 35 °C |
流速 | 1.0 mL/min |
进样量 | 20 µL |
流动相 | 乙腈+水=88+12 |
荧光检测器 | 激发波长384nm，发射波长406nm |
3.2色谱图
图3.苯并(a)芘液相色谱图（1.0 ng/mL）
4结果与讨论
为了验证该方法的回收率，本实验取1 g油脂样品，加入苯并(a)芘标准品（1.0 ng）进行加标回收验证(n=3)，数据如表-2所示。加标回收率在88%-93%之间，RSD值控制在5%以内。说明该方法能够很好地运用于油脂中苯并(a)芘的检测。
表-2.油脂样品苯并(a)芘加标回收率及RSD值（n=3）
序号 | 化合物 | 回收率（%）样品1 | 回收率（%）样品2 | 回收率（%）样品3 | 平均 回收率(%) | RSD(%) |
1 | 苯并(a)芘 | 88.4 | 89.8 | 92.4 | 90.2 | 2.3 |
5总结
5.1 本解决方案操作方便，集样品净化和浓缩一体，回收率高，稳定性好，符合GB 5009.27-2016《食品安全国家标准 食品中苯并(a)芘的测定》的质控要求。
5.2 睿科集团SPEVA08N全自动样品净化浓缩仪将高通量固相萃取与高通量氮吹进行一体结合，可同时进行8通道样品净化与浓缩，支持样品架/收集架/柱架/柱插杆自动识别，氮吹浓缩自带通道红外定容，兼容常规SPE柱模式、大体积上样模式、枪头上样模式和膜萃取模式，一机多用，真正为批量前处理提供帮助。
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