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在IPTG(异丙基硫代β-D-半乳糖苷)的诱导下,β半乳糖苷酶能将X-Gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)切割成半乳糖和蓝色的底物5-溴-4-靛蓝。因此,任何携带lacZ基因的质粒载体转化到β半乳糖苷酶突变的大肠杆菌细胞后,都会在涂有IPTG和X-Gal的培养基平板上形成蓝色菌落。...
当外源基因插入时,二者溶为一体后,有β-半乳糖苷酶表达,在生色底物5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(x-gal)培养基中形成兰色菌落。而当有外源基因插入到多克隆原点,从而造成插入失活,而使 lacZ基因不表达而形成白色菌斑。 通过颜色不同而区分重组子和非重组子。位于不同载体或染色体上的...
大肠杆菌和大肠菌群培养条件:35°C,培养24小时判读:大肠菌群因为产生beta-半乳糖苷酶而形成蓝色或蓝绿色菌落,而大肠杆菌因为产生特定的β葡萄糖醛酸酶而形成靛青至紫色的菌落。无论颜色深浅,所有有色(蓝色/蓝绿色和靛青/紫色)菌落都应计数为总肠道菌群。只有靛青至紫色菌落计为大肠杆菌。酵母和霉菌培养条件培养条件:25 °C,培养48小时判读:所有活性菌落都将呈红色。...
利用大肠杆菌内源性 β-D-葡糖醛酸糖苷酶(β-D-glucuronidase,GUS)可以将 4-甲基伞形-β-D-葡糖醛 酸 糖 苷 ( 4 - Methylumbelliferyl - - β - D -glucuronidase,MUG)分解为葡萄糖苷、甲基伞形酮,从而形成荧光特异性的产物,在长波 UV 光为 366nm下可见,并且产物的荧光强度与大肠杆菌的数量呈现正比的关系,利用所得的线性关系可定量检测食品中的大肠杆菌...
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