ASTM E2172-22
利用线虫 (Caenorhabditis elegans) 进行实验室土壤毒性试验的标准指南

Standard Guide for Conducting Laboratory Soil Toxicity Tests with the Nematode Caenorhabditis elegans

标准号

ASTM E2172-22

发布

2022年

发布单位

美国材料与试验协会

当前最新

ASTM E2172-22

 

 

引用标准

ASTM D4447 ASTM E1295 ASTM E1676 ASTM E1706 ASTM E943

适用范围

1.1 本指南涵盖了获取实验室数据的程序，以通过土壤毒性测试评估与土壤相关的化学品对线虫的不利影响。本标准基于指南E1676的修改。这些方法旨在评估陆地系统短期测试中对线虫的致死或亚致死毒性作用。待测土壤可以是（1）参考土壤或潜在有毒土壤地点； (2) 添加了化合物的人造土壤、参考土壤或现场土壤； (3) 用参考土壤稀释的场地土壤； (4) 用人工土壤稀释的现场土壤或参考土壤。描述了秀丽隐杆线虫的测试程序（见附录 A1）。本指南中描述的方法也可用于对其他陆地物种进行土壤毒性测试，尽管可能需要进行修改。
1.2 先前研究总结——使用自由生活的食菌土壤线虫秀丽隐杆线虫进行初步土壤毒性测试是由 Donkin 和 Dusenbery 开发的 (1)。2 在开发出一种从测试土壤中回收秀丽隐杆线虫的有效方法后，使用有机体来确定影响锌、镉、铜和铅毒性的因素 (2)。弗里曼等人。通过减少土壤量和加标溶液体积、确定测试可接受标准以及开发控制图以使用铜作为参考毒物评估蠕虫健康状况，进一步完善了线虫生物测定 (3)。最近，比较了两种天然土壤中硝酸盐和氯化物金属盐的毒理学效应 (4)。研究发现，线虫在人工土壤中暴露于镉、铜、锌、铅和镍的硝酸盐（见附件 A2）24 小时后，其 LC50 值与蚯蚓 Eisenia fetida 的 LC50 值相似 (5) 。将暴露时间增加到 48 小时会导致 LC50 值显着降低 (6)。然而，较长的暴露时间需要添加食物，并导致有机质含量高的土壤的恢复百分比较低。回收方法的改进也已用于线虫转基因菌株，用作土壤生物监测工具，以评估土壤中金属暴露的亚致死效应 (7)。使用水生介质中的秀丽隐杆线虫开发了多种亚致死终点，并且可能对评估土壤暴露有用 (8)。
1.3 特殊需要可能需要修改这些程序。使用典型程序进行的测试结果可能无法与使用本指南的结果进行比较。使用这些程序的修改版本和未修改版本获得的结果的比较可能提供有关用陆生蠕虫进行土壤毒性测试的新概念和程序的有用信息。
1.4 用于毒性试验以确定土壤毒性的空间或时间分布的现场采集土壤的结果可以根据对生存或亚致死终点的生物效应来报告。当对温度、pH 值和土壤特性（例如颗粒大小、有机物含量和粘土含量）等因素感兴趣或需要测试时，可以使用这些程序进行适当修改来进行土壤毒性测试。诸如污水污泥之类的材料。这些方法也可用于进行生物累积测试。
1.5 毒性试验结果：(1) 通过实验添加到人造土壤、参考土壤或场地土壤中的材料（例如化学品或废物混合物），(2) 用参考土壤稀释的场地土壤，以及 (3) 场地或参考土壤用人造土壤稀释土壤以产生一系列浓度，可以用 LC50（半数致死浓度）和有时用 EC50（半数效应浓度）来报告。
1.6 本指南的安排如下： 范围 1 参考文件 2 术语 3 指南摘要 4 意义和用途 5 干扰 6 仪器 7 安全预防措施 8 土壤 9 试验生物 10 程序 11 1 本指南由 ASTM E50 环境委员会管辖评估、风险管理和纠正措施由生物效应和环境归宿小组委员会 E50.47 直接负责。当前版本于 2022 年 8 月 1 日批准。2022 年 9 月发布。最初于 2002 年批准。上一版本于 2014 年批准为 E2172–01(2014)。 DOI：10.1520/E2172-22。 2 括号内的黑体数字指的是本标准末尾的参考文献列表。版权所有 © ASTM International，100 Barr Harbor Drive，PO Box C700，West Conshohocken，PA 19428-2959。美国 本国际标准是根据世界贸易组织贸易技术壁垒（TBT）委员会发布的《关于制定国际标准、指南和建议的原则的决定》中确立的国际公认的标准化原则制定的。 1 分析方法 12 测试的可接受性 13 结果的计算 14 报告 15 附件 A1。秀丽隐杆线虫 A2。人造土壤成分参考 1.7 以 SI 单位表示的值应视为标准。
1.8 本标准并不旨在解决与其使用相关的所有安全问题（如果有）。本标准的使用者有责任建立适当的安全、健康和环境实践，并在使用前确定监管限制的适用性。虽然本指南中包含了一些安全考虑因素，但涵盖进行土壤毒性测试所需的所有安全要求超出了本标准的范围。具体预防性说明在第 8 节中给出。
1.9 本国际标准是根据世界贸易组织贸易技术壁垒（《关于制定国际标准、指南和建议的原则的决定》中确立的国际公认的标准化原则制定的） TBT）委员会。

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