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如有必要,可以优化融合条件(基本方案,第 5 步) 4.加入 8 ml 无血清培养基,立即 400g 离心 5 min。 5.小心吸出培养基,再用 IOml 无血清培养基重悬细胞。再次离心。室温下,吸出培养基,用 IOml 血清培养基重悬细胞。洗的过程中要格外小心,因为此时细胞的膜很脆弱。 6.加 3 ml 细胞悬液到每个 IOOmm 组织培养板内。...
5.小心吸出培养基,再用 IOml 无血清培养基重悬细胞。再次离心。室温下,吸出培养基,用 IOml 血清培养基重悬细胞。洗的过程中要格外小心,因为此时细胞的膜很脆弱。6.加 3 ml 细胞悬液到每个 IOOmm 组织培养板内。加 ImI 细胞悬液到另一 100 mm 培养板内,作为对照。孵育 36~48 h。7.用加血清和筛选因子的培养基培养细胞(用未加筛选因子作对照)。...
用无血清的温热培养基洗涤细胞一至两次,加入含 10% 胎牛血清的完全培养基。如果需要丁酸钠促进转染,则继续步骤 5, 如果不需要,则在含 5%~7%CO2 的 37°C 温箱培养细胞 48 h。然后直接进行步骤 6(检测瞬时转染)或 7(稳定转染)。DMSO 处理的细胞易于脱落,因此在弃去含溶剂的培养基及加入新培养基时应尽可能动作轻柔,比如,每次换液时沿着培养皿侧壁吸培养基。5....
每个批次的牛血清白蛋白的IgG含量不高于0.05mg/g。4、低脂肪酸级别用于体外胚胎移植,也可作为胚胎移植的饲养层营养物以及表面活性添加剂。可用于常规的细胞培养及组织培养。作为干细胞培养的添加剂,作为无血清培养基载体以及作为营养添加剂。利用亲和层析法去除脂肪酸以及其他小分子。每个批次的牛血清白蛋白的脂肪酸含量不高于0.05mg/g。...
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