二苯胺法测定DNA含量【实验目的】 掌握二苯胺法测定DNA含量的原理和方法 【实验原理】 DNA分子中2-脱氧核糖残基在酸性溶液中加热降解,产生2-脱氧核糖并形成ω-羟基-γ-酮基戊酸,后者与二苯胺试剂反应产生蓝色化合物,其反应如下图。蓝色化合物在595nm处有最大吸收,且DNA在40µg ~400µg范围内时,吸光度与DNA浓度成正比。在反应液中加入少量乙醛,可以提高反应灵敏度。...
二苯胺试剂称取1g 二苯胺, 溶于100mL 的分析纯的冰乙酸中,再加入60%以上的过氯酸10mL,混匀待用。临用前加入1mL 的1.6%乙醛,配好的试剂应为无色。4.分光光度计(三)操作方法1. 制作DNA 标准曲线:取12 支洁净干燥试管按表1 加入试剂:表1 DNA标准曲线制作按上表加完各试剂后,充分混匀。...
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