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免疫蛋白印迹结果怎么看

(westernblot)异常结果分析

免疫印迹试验(westernblot)异常结果分析

蛋白质印迹是一种非常适用于蛋白质检测的技术,因为它允许用户量化蛋白质表达。本文主要介绍一些该技术结果异常的排除方法。因为研究人员试图获得一种非特异性但强烈的信号,蛋白质印迹可以被视为一种错综复杂的平衡。即使蛋白质印迹的程序很简单,也会出现许多问题,导致意想不到的结果。该问题可分为五类:(1)异常或意外的条带,(2)无条带,(3)微弱条带或弱信号,(4)印迹背景高,(5)斑点或不均匀斑点污点。不寻常或意外的条带可能是由于蛋白酶降解,其在意外位置产生条带。在这种情况下,建议使用保存在冰上或改变抗体的新鲜样品。如果蛋白质位置太高,那么重新加热样品可以帮助打破四元蛋白质结构。类似地,模糊带通常由转移期间存在的高压或气泡引起。在这种情况下,应确保凝胶在较低电压下运行,并且适当地制备转移夹层。此外,更改运行缓冲区也可以解决问题。由于...........

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正的定量结果。 但是,对蛋白印迹进行标准化的最佳方法是什么? 过去,金标准标准化方法是使用看家蛋白,基于这些蛋白在不同实验条件下和细胞系中表达一致的假设。 然而,最近的研究表明,这种假设并不总是正确的

学发光凝胶成像仪进行曝光,拍照。 7. 数据分析:目的蛋白的灰度值除以内参GAPDF的灰度值以校正误差,所得结果代表某样品的目的蛋白相对含量。 8. 提供实验报告,包括详细的实验方法及免疫印迹实验结果的相关图表。  

卓灏医药上海原理:免疫印迹(immunoblotting)又称蛋白质印迹(Western blotting),是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。该法是在凝胶电泳和固相免疫测定