这个细胞对生长环境的要求非常之高。除了大家熟知的培养液条件的苛刻外（此不详述，又不懂的可留言问），对生长的空间问题要求比较高。在每一次传代消化的时候，要消化足够长的时间，要不停地在镜下观察细胞的消化状态。因为这个细胞长的比较厚，所以消化比较困难。需要耐心。而消化的结果应该是保证足够多的细胞都是成单个状态而不是抱团或者成片。对于这一点，常规消化是比较难做到的。所以需要采取点特殊措施，我一般是这样做的：首先吸干净原培养基，加入PBS洗，至少洗两遍，第二遍可以时间长一点，起到一定浸润作用，然后吸走，加入少量含EDTA的胰酶（以下简称YE）润洗 

我的Caco-2细胞养了２１天了，没有清洗时电阻都只有２００多欧／cm2,用ＨＢＳＳ清洗后就只有１００多．在显微镜下还可以看到小空隙了！请问在种细胞之前是不是要在膜上涂鼠尾胶原喃（我没有涂）．有人知道电阻上不去的原因嘛？急切求助．