如何从正相柱换为反相柱?流动相相应的从正己烷改为甲醇和水。请大侠们给予回答，非常感谢！

需要用氨基柱做糖分析，因此需要在反相条件下使用氨基柱，在网上检索了一下，关于氨基柱反相使用的条件，一种说法是：先用异丙醇冲洗管路；然后接上色谱柱用低流速（0.1ml/min）用30倍柱体积的异丙醇过渡，再换上流动相；另一种说法是：1. 先用正己烷-乙腈（99：1）以0.5ml/min的流速冲10倍柱体积，再依次以相同的流速相同的用量用氯仿、异丙醇、甲醇、甲醇-水（50：50）冲柱子。2.以0.5ml/min的流速用30倍柱体积的pH11.0的氢氧化钠（LUNA）水溶液冲柱子（注意pH值切不可超过11.0），立即用水（0.5ml/min的流速，30倍柱体积）冲洗，再换成流动相。请教一下，应该用哪一种方法。 

　　RID示差检测器操作　　一、操作步骤　　1、按shift 和8R flow 以冲洗参比池流路20min，此时，R flow灯亮。　　2、反复开关R flow数次以消除池内气泡。　　3、关闭R flow，等待至基线稳定。　　4、当blance value大于50时，按blance键平衡光路。(如小于50，不必此操作。)　　5、等待基线稳定后，开始分析。　　二、要得到稳定基线，应注意：　　1、保持室温恒定　　2、溶剂脱气以减少溶剂内溶解的气体　　3、连接大内径废液管以降低检测器出口背压　　系统内无在线脱气装置时，一般使用0.3 mmid废液管已产生一定背压而避免生成气泡 

　缓冲液可以提供离子平衡的反离子，并使流动相保持一定的离子强度和ph值，减少拖尾。　　但是使用缓冲液要注意几点　　1：避免使用盐酸盐，盐酸盐对钢质有腐蚀作用。　　2：缓冲液最好要现配现用，往往缓冲液是良好的菌类培养液，隔天或放置长时间实验时会有很多怪现象发生。　　3：实验后不可用有机溶剂直接过度，有机溶剂会处使盐类析出，造成液路或色谱柱堵塞，可用95：5的水甲醇冲洗。*** 

　　第一篇　　气相色谱维修维护经验　　要分析和判断色谱仪的故障所在，就必须要熟悉气相色谱的流程和气、电路这两大系统，特别是构成这两个系统部件的结构、功能。色谱仪的故障是多种多样的，而且某一故障产生的原因也是多方面的，必须采用部分检查的方法，即排除法，才可能缩小故障的范围。对于气路系统出的故障，不外乎是各种气体(特别是载气)有漏气的现象、气体不好、气体稳压稳流不好等等，气路产生的“鬼峰”和峰的丢失较为普遍。另外，色谱柱的“老化”过程没有充分或柱温过高，产生的“液相遗失”等“鬼峰”也会频频出现。所以，首先应该解决气路问 

一.做HPLC分析时，柱压不稳定，原因何在?如何解决?　　原因可能有：　　1泵内有空气，解决的办法是清除泵内空气，对溶剂进行脱气处理;　　2比例阀失效，更换比例阀即可。　　3泵密封垫损坏，更换密封垫即可。　　4溶剂中的气泡，解决的办法是对溶剂脱气，必要时改变脱气方法;　　5系统检漏，找出漏点，密封即可。　　6梯度洗脱，这时压力波动是正常的。　　二.请问HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法"1样品量不足：解决办法为增加样品量　　2样品未从柱子中流出：可根据样品的化学性质改变流动相或柱子　　3样品与检测器不匹配：根据样品化