知识堂：液相色谱（五）

5、检测器

检测器是液相色谱的三大关键部件之一。理想的检测器应具有以下特点：

• 灵敏度高;
• 对温度变化和流量波动不敏感;
• 死体积小，不使峰额外地扩展;
• 对溶剂无响应，能用于梯度洗脱操作;
• 线性范围宽;
• 对所有样品都有响应;
• 对样品无破坏性。

在高效液相色谱技术发展中，至今还没有一种检测器可以同时满足以上几点要求。

检测器的主要性能指标：

• 噪声(Noise)和漂移(Drift);
• 灵敏度(Sensitivity);
• 检测限(Detectability);
• 线性范围(Linear range);
• 波长的精度和准确度。

检测器的种类繁多，常用的有紫外一可见分光检测器、荧光检测器、示差折光检测器、电化学检测器、二极管阵列检测器、测定大分子绝对分子量的多角度激光光散射仪。另外还有蒸发光检测器、化学发光检测器、手性检测器(旋光检测器、圆二色检测器)、分子量检测器、放射性检测器、热学性质检测器、光电导检测器、磁旋光检测器等。

5.1 紫外检测器

紫外检测器应用最广，对大部分有机化合物有响应。特点是灵敏度高；线形范围高；流通池可做的很小（1mm×10mm ，容积 8μL）；对流动相的流速和温度变化不敏感；波长可选，易于操作；可用于梯度洗脱。

它与固定波长紫外检测器的主要差别在于使用一个连续光源（如氘灯），以光栅（或棱镜）分光。光源发出的复合光（从190nm至600nm附近），光栅分光能够随意选择定的检测波长以匹配被测物质的最大吸收波长。

5.2 光电二极管阵列检测器

光电二极管阵列检测器由1024个二极管阵列，各检测特定波长，计算机快速处理，三维立体谱图，如图所示。

二极管阵列检测器可以记录190nm-900nm波长吸收光谱数据，可直接贮存色谱图中每一个点的吸收光谱。光源发出的光，通过透镜把光聚焦在检测池上。从检测池出来的光，通过透镜、狭缝到全息光栅上，经光栅分光后由一排光电二极管接收并转换为电信号，贮存于计算机中。DAD的最大优点在于利用ＵＶ光谱识别并进行纯度分析，还可以画出保留时间、波长和吸光度的三维立体空间谱图等，这是目前较先进的紫外检测器。下图是DAD检测器工作原理示意图。

5.3示差折光检测器

示差折光检测器是除紫外检测器之外应用最多的检测器，可连续检测参比池和样品池中流动相之间的折光指数差值。差值与浓度呈正比，也是一种通用型检测器（每种物质具有不同的折光指数），缺点是灵敏度低、对温度敏感、不能用于梯度洗脱；有偏转式、反射式和干涉型三种；

5.4荧光检测器

现代的荧光检测器具有高的灵敏度和可靠性，可用波长时间程序自动切换激发、发射波长在多组分分析时可切换到各组分的最佳分析波长，实现高灵敏度和高效率。利用波长扫描功能，可在工作站系统控制器的画面上显示目的成分的激发、发射光谱，很容易进行最佳波长的选定。

荧光检测器具有高灵敏度、高选择性，对多环芳烃，维生素B、黄曲霉素、卟啉类化合物、农药、药物、氨基酸、甾类化合物等有响应。其示意图为

5.5蒸发光检测器

蒸发光检测器(evaporationla sersp urtd etector,ELSD)是质量型、高灵敏度的通用液相色谱检测器。它检测的三个主要过程为

• (1)雾化：色谱柱流出物经过针头式的细导管进人雾化器，与气体混合喷成均匀一致的雾滴；
• (2)蒸发：雾滴经过加热的漂移管，流动相被蒸发，溶质形成极细的颗粒；
• (3)检测：溶质颗粒气体在检测池发生散射作用，经光电倍增管成电信号输出。

基于它的工作原理，原则上对所有的化合物都能测定，不论化合物是否存在生色团或电活性基团；检测器的响应直接与被洗脱化合物的质量有关，对未知物可以得到准确的定量；因在检测前被洗脱的化合物已除去流动相，适用于梯度洗脱。由于它的这些优点，它有可能像气相色谱中的氢火焰检测器(FID)那样成为液相色谱的高灵敏度通用检测器。

还有一些其它检测器（略）。