PathoMPS™多重食源性致病菌核酸检测系统的优点和原理

　　基于多重PCR技术，创新的PathoMPS™整合了快速样品处理技术、快速热循环技术、全自动毛细管电泳技术和智能化结果分析软件，能够筛检常见食源性致病菌、鉴定病原型别、分析毒力基因携带情况，让食源性致病菌检测变得更加简便、快捷。在PathoMPS™系统中，多重PCR技术将多个目标基因在一个反应体系中同时扩增；全自动毛细管电泳技术提供了标准化和自动化的多重PCR产物分析手段，可实现40分钟内自动分析多达96个样品；智能化结果分析软件将PathoMPS™原始数据进行自动识别、分析和判断，作出专业化的检测结论。

食源性致病菌传统检测技术的不足是什么？

食源性致病菌是导致食品安全问题的重要生物性因素之一，也是国际国内食品安全领域关注的焦点。传统的食源性致病菌检测技术具有时效性差、敏感度低、操作繁琐的不足，最重要的是它们无法区分致病菌和非致病菌，不能对微生物毒力基因进行分析，这将导致食品安全风险评估的数据不完整，无法做出客观的风险预测。

基于当前食品安全领域的迫切需求，PathoMPS™系统整合了先进的技术平台，配套14种常见食源性致病菌、五种致泻性大肠埃希氏菌、四种志贺氏菌、五种致病性弯曲菌、副溶血性弧菌毒力基因、小肠结肠炎耶尔森氏菌毒力基因、大肠埃希氏菌O157：H7毒力基因、大肠埃希氏菌O104：H4毒力基因、腹泻病毒多重PCR检测试剂。

通过多重PCR的系统筛检，不仅能够鉴定微生物的种类、确定是否为致病株及含有的毒力基因，而且能够实现重点微生物的准确分型，最大程度地补充了传统方法的弊端，将为食品安全风险评估工作提供客观的判断依据。

多重PCR技术应用存在怎样的两难境地？

多重PCR可在一次反应中检测多个目标基因，具有单个PCR无可比拟的优越性，能够在一个反应体系中检测一组相关联目标，大大的节省时间和试剂成本。

但为什么多重PCR在二十多年时间里没有充分得到应用呢？

• 多重PCR技术本身：多重PCR技术使用多个引物对，可能产生多个靶标，产生引物二聚体和/或非特异性产物的机会大大增加，且不同引物对间的竞争会使扩增效率低的目标被扩增效率高的目标抑制，造成整个PCR反应的不平衡性。
• 检测平台：普通多重PCR检测平台可以在一个反应体系中进行多达20重的检测，但产物分析需要开管跑胶，繁琐的后续电泳操作步骤和复杂的多重PCR产物成分往往造成电泳结果不稳定，甚至失败，人工判定实验结果变得难上加难，更为严重的是开管跑电泳容易造成实验环境的污染。这些都限制着多重PCR技术的进一步应用。
• 检测成本：市场上也有一些技术创新性的多重PCR产品，通常都采用了高端平台，比如一代测序仪、基因芯片等，不仅投入的仪器设备或专业分析人员非常昂贵，而且试剂成本也是日常检测所无法承受的。

PathoMPS™多重食源性致病菌核酸检测系统基于北京卓诚惠生生物科技有限公司独有的多重PCR技术，将多重PCR的技术优势发挥到淋漓尽致的同时，通过整合快速样品处理技术、快速热循环技术、全自动毛细管电泳技术和智能化结果分析软件，有效地解决了传统多重PCR技术存在的多种弊端，获得经济、实用的多重PCR检测平台。

PathoMPS™系统组成是什么？

PathoMPS™系统由样本处理模块、核酸扩增模块、产物分析模块、结果判定模块和配套试剂组成。

• 样本处理模块：系统提供多样化、简便快捷的样本处理方案，在一个反应管内30分钟完成核酸提取。
• 核酸扩增模块：核酸扩增模块主要提供多重PCR运行的温育环境。PathoMPS™系统的核酸扩增模块选择S1000 Thermal Cycler热循环仪。预置反应程序，仅需简便的操作便可运行程序。专利的蜂巢式加热模块，提供高速运行时的精准温控。
• 产物分析模块：多重PCR产物分析的核心功能化模块之一，该模块提供了自动化的电泳分离和原始结果输出。PathoMPS™系统选择QIAxcel advanced作为产物分析模块的核心设备。QIAxcel advanced能在40分钟内自动完成96个样本的电泳分离，同传统电泳相比, 它具有高效、快速、灵敏、高度自动化等特点, 并且所需样品量和溶剂消耗少、运行 成本低、对实验环境污染小。
• 结果判定模块：基于QIAxcel ScreenGel软件和PathoMPS™数据分析管理系统实现智能化的毛细管电泳条带识别和专业化的检测结果判定，同时将原始结果数据存储在数据库中，可根据用户需求生成检测报告。
• 配套试剂：PathoMPS™系统作为一个整体解决方案，不仅提供功能实现的硬件支撑，还提供全套试剂供应以发挥最大化的系统性能。

试剂名称	检测性能
细菌DNA提取试剂盒	提取细菌全基因组DNA。
14种常见食源性致病菌多重PCR检测试剂盒	一次PCR反应筛检沙门氏菌、志贺氏菌、副溶血性弧菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、大肠埃希氏菌O157血清型、单增细胞增生性李斯特氏菌、蜡样芽孢杆菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌、阪崎肠杆菌、霍乱弧菌、结肠弯曲菌、空肠弯曲菌、嗜水气单胞菌。
五种致泻性大肠埃希氏菌多重PCR检测试剂盒	检测12个基因对EHEC, ETEC, EIEC, EPEC, EAEC五种致病型别准确分型，还可筛选和提示新型的大肠埃希氏菌致病菌株。
四种志贺氏菌多重PCR检测试剂盒	快速鉴定宋内志贺氏菌、福氏志贺氏菌、痢疾志贺氏菌和鲍氏志贺氏菌。
五种致病弯曲菌多重PCR检测试剂盒	快速鉴定空肠弯曲菌、结肠弯曲菌、海鸟弯曲菌、胎儿弯曲菌胎儿亚种、乌普萨拉弯曲菌和其他弯曲菌。
副溶血性弧菌毒力基因多重PCR检测试剂盒	检测toxR、tlh、trh、tdh基因，鉴定副溶血性弧菌及其致病性。
大肠埃希氏菌O157:H7多重PCR检测试剂盒	鉴定大肠埃希氏菌O157:H7及特征性毒力基因谱（stx1、stx2、eaeA、hlyA）。
小肠结肠炎耶尔森氏菌多重PCR检测试剂盒	鉴定小肠结肠炎耶尔森氏菌携带ail、ystA、ystB、yadA、virF毒力基因及O:3血清型。
大肠埃希氏菌O104:H4多重PCR检测试剂盒	鉴定和分析大肠埃希氏菌O104：H4，及与其致病相关的典型毒力基因谱（stx1、stx2、eaeA、aggR）。
腹泻病毒多重PCR检测试剂盒	鉴定轮状病毒A组、诺如病毒GI、诺如病毒GII、腺病毒、札如病毒、博卡病毒、星状病毒等腹泻病毒。
DNA Size Marker	DNA分析用尺寸Marker 100bp-1500bp。
Alignment Marker	PCR产物分析用比对Marker 15bp/2000bp。

PathoMPS™系统具有全面、简便、经济和灵敏度高等技术特点，适用于疾病预防控制机构、出入境检验检疫部门，用于开展病原体筛查、致病株检测、分型检测和毒力基因分析等。为环境检测、检验检疫工作、食品卫生检验工作提供一种时效性强、操作简便和准确可靠的解决方案。