使用层析的方法对蛋白质分子进行纯化进而进行表征是相关基础与应用研究既普遍又都必不可少的操作。
传统的树脂层析柱在蛋白纯化发展的进程中发挥了巨大的作用，但也存在一些弊端，例如：
过程耗时、装柱及脱气等操作繁琐
难以实现高通量，
硬件投入大 等等
为了解决这些问题，膜层析技术应运而生。如果您对膜层析技术还没有深入的了解，那让我们一起通过剑桥大学解剖学系 Alan R. Johnson 博士的平行对比实验看看膜层析技术与传统树脂凝胶层析纯化在所需时间、蛋白质产量和活性及成本和设备要求几个方面的对比。
Vivapure®膜层析离心柱：轻松实现高通量
Sartobind® 膜层析柱：纯化如过滤般简单（可接注射器、蠕动泵与FPLC系统）
实验使用DEAE阴离子交换树脂层析柱和离心型阴离子交换膜层析Vivapure® D柱，分别用于纯化可溶性轴突生长抑制蛋白，该蛋白从第 7 天的鸡胚晶状体中获得。它能够引导视网膜神经节细胞（RGC）轴突走向视神经盘，并在视神经盘聚集成束形成视神经。
实验结果
蛋白质产量和活性的对比
在这两种方法中，1M NaCl 洗脱液中的总蛋白质含量最低，但活性最高。Vivapure® 纯化的样品尤为如此。这表明使用Vivapure® 层析柱进行蛋白纯化可实现更高分辨率的分离。
所需时间
两种分离方法所需的时间有很大差异，使用膜层析离心柱分离所需的时间不到20 分钟，而使用传统柱层析法分离所需的时间为数天。
成本和设备要求
使用Vivapure® 无需昂贵的硬件投入，仅需低速离心机即可，因此成本投入比传统凝胶法低67%。
可见新兴的膜层析技术在这几个方面均有不可比拟的优势。不仅如此，膜层析的优势还包括：
不需装柱，不需脱气操作及其简单
流速快，1h能进行112个循环，特别适合筛选和条件优化
可以使用离心、注射器、蠕动泵、FPLC系统操作
产量高，特别是病毒样颗粒
易于放大且能耗低
因此创新且可靠的纯化方法的问世可以带来研究速度的提升，简化工作流程节约成本和费用，我们有理由相信，未来膜层析在蛋白纯化领域将发挥更加巨大的价值。
下载全文
了解与咨询 Sartobind® 实验室膜层析产品