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工商注册信息已核实!领域: | 动物性食品及其制品 | ||
样品: | 氨基酸分析仪检测蛋白饲料中的蛋白水解氨基酸 | 项目: | 氨基酸分析仪检测蛋白饲料中的蛋白水解氨基酸 |
参考: | https://www.dksh-instrument.cn/Solution/571 |
摘要
本品为未知含量及种类的蛋白饲料类样品,使用Biochrom30+全自动氨基酸分析仪,对其所含的氨基酸组分及含量进行分析。结果表明该未知样中氨基酸各单个氨基酸含量的浓度见附页结果表。其中样品所有氨基酸总含量为34.730 umol/mL。
一、样品前处理 1、所用试剂 1.1 Loading Buffer:钠盐系统,pH 2.2 1.2 浓盐酸,浓度≥36%,优级纯 1.3 6mol/L 盐酸:取500mL 盐酸加水稀释至1000mL,混匀 1.4 水:去离子水 1.5 17种氨基酸标准品
2、前处理设备 1)分析天平:精度为 0.0001g 2)移液枪及枪头 3)一次性注射器及0.22um滤膜 4)低范围pH试纸 5)真空干燥烘箱 6)无油真空泵 7)电热平板及称量瓶 3、样品制备(参考食品中氨基酸的测定) 天平准确移取适量试样,加入水解管中,加入10mL 6mol/L盐酸(1.3),冷冻3min⁓5min,接到真空泵的抽气管上,抽真空(接近0Pa),然后充入氮气,重复抽真空-充入氮气步骤3次后,在充氮气状态下拧紧螺盖。将水解管放入真空干燥箱中,110°C水解22-24h,冷却、混匀、开管、转移并定容到50ml容量瓶中,用移液枪取适量水解液于称量瓶中,在电热平板上60℃浓缩至干,必要时加入少许水(1.4),重复蒸干1-2次,加入适量PH2.2的稀释上机用柠檬酸钠缓冲液溶解(1.1),振荡混匀后,吸取溶液通过0.22 μm 滤膜后,转移至进样瓶,为样品测定液,供仪器测定用。 二、分析方法描述(Biochrom 30+) 氨基酸分析仪分析方法参数: 1)色谱柱:Biochrom Na型阳离子交换树脂柱,4.6x20cm 2)分离程序:
运行时间:经分析时间+再生时间 61.04 min 3)反应单元温度:135°C 4)检测波长:570nm、440nm同时检测 三、样品中氨基酸含量的计算 样品测定液氨基酸的含量按式(1)计算: Ci = Cs/As × Ai× F ··············(1)式中: Ci ———样品测定液氨基酸i的含量,单位为纳摩尔每毫升(nmol/mL); Cs ———氨基酸标准工作液氨基酸s的含量,单位为纳摩尔每毫升(nmol/mL); Ai ———试样测定液氨基酸i的峰面积; As ———氨基酸标准工作液氨基酸s的峰面积; F ———样品稀释倍数。 附、蛋白饲料类样品的蛋白水解氨基酸其分析图谱及做样结果: 图1. 样品01