依据中国药典使用 LUMEX毛细管电泳Capel分析佐米曲普坦手性异构体

发布时间： 2022-03-28 17:10:33 来源：LUMEX分析仪器

2020年版药典二部和四部进一步扩大了现代分析技术的应用，丰富了色谱检测器的类型，加强了没有紫外吸收品种液相色谱检测器的应用指导，如采用毛细管电泳法检查佐米曲普坦分散片中的光学异构体等。毛细管电泳法在药典中的使用日益增多，药典通则0542中提到以（1）毛细管区带电泳（CZE）和胶束电动毛细管色谱（MEKC）使用较多，常用来解决异构体拆分，也可用于无机离子检测等，LUMEX公司的Capel 系列 CE可以进行多种方式的分离检测，提供可靠的分析方法。

本实验采用依据2020版《中华人民共和国药典》使用LUMEX毛细管电泳仪Capel 205建立手性分离方法并检查佐米曲普坦光学纯度，通过手性拆分剂种类及浓度、缓冲液pH及浓度、温度及电压的优化，选择最佳的手性分离条件，基线分离了佐米曲普坦及其对映体。实验结果表明通过Capel205建立的毛细管电泳法可用于佐米曲普坦的手性分离，分离良好，为产品的质量控制提供了可靠准确的分析方法。

1. 实验仪器及条件

1.1 实验仪器：LUMEX 公司的Capel 105M或者Capel205 毛细管电泳仪

1.2 实验试剂

pH 计、十万分之一天平、离心机、容量瓶（10ml、50 mL、100 mL）、烧杯（50 ml）、量筒（100 ml）、锥形瓶（250 ml）、移液枪（1ml、10 mL）、磷酸二氢钾、磷酸（分析纯）、2-羟丙基-β-环糊精、佐米曲普坦 R-异构体对照品。

1.3 实验条件

毛细管规格：弹性石英毛细管（长度：75cm 内径：50um）；毛细管温度30 ℃；磷酸二氢钾溶液0.025 mol/L：称取磷酸二氢钾0.17g于50 mL的锥形瓶中，用水定容至50 mL，磷酸调节pH至2.0；羟丙基-β-环糊精溶液0.03 mol/L：取羟丙基-β-环糊精0.227 g，加0.025 mol/L磷酸二氢钾液（pH 2.0）（或者0.05 mol/L）稀释至10 mL为运行缓冲液(50 摄氏度加热溶解)；分离电压20 Kv-25kv；检测波长220 nm；运行时间18 分钟。

2. 实验分析

2.1样品制备

供试品溶液制备：称取本品20 mg-50mg置于100 mL容量瓶中，用水或者0.1 mol/L的盐酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

对照品溶液制备：精密量取1 mL 供试溶液，置于200 mL容量瓶中，用水或者0.1 mol/L的盐酸溶液稀释至刻度，摇匀。

系统适应性溶液制备：取佐米曲坦普对照品和R-异构体对照品适量，加水或者0.1 mol/L的盐酸溶液并稀释成1mL中含佐米曲普坦0.5 mg与R-异构体2.5 μg的溶液。

2.2 分析测定

用磷酸盐缓冲溶液以1000 mbar压力冲洗毛细管10分钟。

取系统适应性溶液，以50 mbar压力进样12秒，调节检测灵敏度，使主央面积能够准确积分，佐米曲普坦 R-异构体与S-异构体的分离度应大于1.5；

再取对照品溶液和供试品溶液分别以50mbar压力进样12秒，记录电泳图谱，按外标法以峰面积计算，供试品溶液中佐米曲普坦R-异构体的量。

2.3 判断标准

供试品溶液中佐米曲普坦R-异构体不得超过0.5%。

3. 实验结果及分析

在此实验条件下，用系统适应性样品溶液、对照品溶液和供试品溶液在本实验条件下分别进样2次，三者的的对比图谱以及毛细管电泳图谱如图1-图4。由谱图看出，整体出峰时间在18分钟以内完成，R-异构体的迁移时间分别为16 min左右，S-异构体的迁移时间在15-16min 之间，在此条件下两个峰能够完全分离，分离度比较高R=3.2，分离良好，满足分析的要求（R≥1.5）。在此条件下，能够对目标物进行定量分析，供试的样品中R-异构体未检出，满足不得超过0.5%的要求。

由图1的比较可以看出，使用Capel205毛细管电泳检测，结果显示供试样品中在图谱上未见佐米曲普坦的峰，能够满足检测要求，提供了可靠准确的分析方法。