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全长转录组(有参_无参)测序

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参考报价: 面议 型号: 全长转录组(有参_无参)测序
品牌: 凌恩生物 产地: 上海
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AI问答
可以做哪些实验,检测什么? 可以用哪些耗材和试剂?

全长转录组,是基于三代测序平台,无需打断拼接,直接获得包含5’,3’UTR,polyA尾的完整转录本,从而准确分析有参考基因组物种可变剪接及融合基因等结构信息,克服无参考基因组物种转录本拼接较短、信息不完整的难题。同时还可以借助二代测序数据,进行转录本特异性表达分析,获得更加全面的注释信息。

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Sequel 测序原理


全长有参转录组:对于有参考基因组的物种,利用三代全长转录组测序获得的信息是生物体内直接存在的,比基于参考基因组预测到的转录组信息更准确,同时也可准确鉴定基因的可变剪接、融合基因、基因家族和非编码RNA等信息。同时基于全长转录组数据,可以优化基因结构,进而辅助基因组组装和注释。

全长无参转录组:由于基因组测序成本高,缺乏基因组参考信息在很大程度上限制了对物种的深入研究。通过三代全长转录组测序来构建物种Unigene库,无需进行序列组装,就可以获得该物种转录组水平的全长转录本信息,更准确的进行CDS和SSR分析,为后续研究提供良好的遗传信息基础。


技术流程

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分析流程图片39.png

全长有参转录组





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全长无参转录组


技术优势

  • 无需进行转录本的拼接便可以直接获得全长转录本序列,能够更真实地反映测序物种的转录组信息;

  • 通过检测多种可变剪接形式,可发现更多的剪接位点和可变剪接事件;

  • 能够发现新的功能基因,补充基因组注释;

  • 有助于融合基因、同源基因、超家族基因或等位基因的精确分析。


送样标准

  • 样品类型:总RNA、组织样;

  • 样品浓度:总RNA浓度≥ 50 ng/ul;

  • 样品体积:> 10 ul;

  • 样品总量:总RNA用量> 10 ug ;

  • 样品纯度:OD260/280≥1.8,OD260/230≥1.0,260nm处有正常峰值;

  • RNA完整性:总RNA的RIN值≥8.0;图谱基线无上抬;5S峰正常。


分析示例


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GO分类统计图


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COG统计图



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KEGG注释统计



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转录因子分析



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lncRNA编码潜能预测图



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差异基因可视化散点图与火山图



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上下调差异基因GO注释柱形图




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SSR的分布情况

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注:该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案,不可用于临床诊断或治疗等相关用途

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