蛋白质定性检测

蛋白质定性检测

      主要用于鉴定单一组分样品或混合样品中的蛋白质种类。样品形式可以是从组织或细胞中提取的蛋白混合物、电泳分离后的单一条带、免疫沉淀富集的蛋白等。蛋白样品经胰酶消化后，使用质谱进行鉴定。既可以使用液质联用质谱平台，也可以使用MALDI-TOF/TOF质谱平台。液质联用质谱平台更适合用于复杂的样品，其分辨率与准确性更高。

技术原理
液质联用的串联质谱法（Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry,LC-MS/MS）鉴定蛋白是蛋白质组学研究的首选平台，特异性强，可靠性高。蛋白经胰酶消化形成的肽段先进入液相色谱进行分离，再进行质谱检测。一级质谱检测多肽分子的大小，然后再将肽段打碎，形成一系列离子，即N端离子系列（ b系列）和 C端离子系列（ y系列），进一步检测碎片离子的大小，即二级质谱。将质谱数据与蛋白数据库进行比对，获得肽段的序列，特定的多肽序列对应着特定的蛋白，从而鉴定出待检测蛋白。如下图所示：

质谱鉴定蛋白原理图

技术优势
1、采用真正的纳流液相系统，具有更高的灵敏度。
2、串联质谱，提供序列信息，蛋白质鉴定可靠性高。
3、采用 Q Exactive LC-MS/MS系统，具有极高的分辨率，尤其适用于复杂样品的鉴定。

技术路线
单个蛋白鉴定
1、用于鉴定纯化的单个蛋白的溶液或粉末，或经过 SDS-PAGE的单个条带或二维电泳的单个点。
2、蛋白酶解成多肽。
3、液质联用质谱检测：液相分离多肽，离子化的多肽进入质谱，母离子检测，母离子裂解成一系列子离子，子离子检测。
4、数据库检索。
5、数据审核，输出检测报告。

全蛋白质组及蛋白混合物的鉴定
用于鉴定含有多种蛋白质的混合物，包括全蛋白提取物等。根据样品的复杂程度采取不同的策略分离后再进行质谱鉴定。对于全蛋白质组，可以先用SDS-PAGE或者液相色谱分级产生15～20个组分，酶切消化成肽段，再使用液质联用质谱鉴定。也可将蛋白混合物直接消化成肽段后，用液相色谱分成15～20个组分，再依次使用液质联用质谱仪鉴定。对于IP实验富集的蛋白样品，可以煮沸后用SDS-PAGE分离成5～10个组分，从胶里面回收消化后的多肽，进行液质联用质谱鉴定。

蛋白质定性检测信息由博奥生物有限公司生物芯片北京国家工程研究中心为您提供，如您想了解更多关于蛋白质定性检测报价、型号、参数等信息，欢迎来电或留言咨询。

注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途