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原核蛋白表达与纯化

参考报价: 面议 型号: 原核蛋白表达与纯化
品牌: 金开瑞 产地: 武汉
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AI问答
可以做哪些实验,检测什么? 可以用哪些耗材和试剂?

原核表达系统,最常用的是大肠杆菌表达系统,将植物、动物、微生物等目的基因插入合适载体后导入大肠杆菌表达大量蛋白,这种方法在蛋白纯化、定位及功能分析等方面都有应用。

大肠杆菌表达系统

1)目前最常用,也是最经济实惠的蛋白表达系统;

2)与其他表达系统相比遗传背景清楚、目的基因表达水平高、培养周期短、抗污染能力强;

服务内容

服务名称服务项目服务内容交付结果服务周期
普通型大肠杆菌重组蛋白表达服务质粒构建采用GST、Trx、SUMO、BMP、His、HA、Flag、myc等多种标签载体进行重组载体构建,可采用PTG、阿拉伯糖、热休克、冷休克等多种诱导方式。表达质粒    测序报告1周
表达菌株筛选转化表达质粒于高效表达E.coli菌株,SDS-PAGE电泳检测挑选合适的单克隆菌株用于目的蛋白表达。BL21 (DE3)、BL21 (DE3) pLys、 Golden、Rosetta(DE3)、 RosettaBlue(DE3)、Rosetta gami B (DE3)、C41、Arctic express等多种宿主菌株供选择。表达菌株  SDS-PAGE图谱3个工作日
目标蛋白表达及纯化、标签切除摇瓶培养2-8 L重组阳性克隆诱导目的蛋白表达。通过亲和层析、离子交换、疏水及凝胶过滤等多种技术纯化目的蛋白,也可根据需求切除标签,再纯化获得目的蛋白。大于1mg目的蛋白,纯度最少90%以上2-3周
包涵体复性数百种缓冲液及复性条件快速筛选得到最佳复性缓冲液及复性条件。可采用稀释复性、透析复性、柱层析复性等多种技术获得纯度大于90%的包涵体蛋白。大于1mg目的蛋白2-3周
上清保证型大肠杆菌重组蛋白表达服务质粒构建采用pCold-SUMO载体,SUMO标签促溶的同时采用低温诱导方式,促进蛋白的可溶性表达。表达质粒    测序报告1周
表达菌株筛选转化表达质粒于Arctic express表达菌株,宿主在表达分子伴侣Cpn60和共分子伴侣Cpn10的同时低温诱导提高上清蛋白的表达量,SDS-PAGE电泳检测挑选合适的单克隆菌株用于目的蛋白表达。表达菌株  SDS-PAGE图谱3个工作日
目标蛋白表达及纯化、标签切除摇瓶培养2-8 L重组阳性克隆诱导目的蛋白表达。通过亲和层析、离子交换、疏水及凝胶过滤等多种技术纯化目的蛋白,也可根据需求切除标签,再纯化获得目的蛋白。大于1mg目的蛋白,纯度最少90%以上3-4周

金开瑞的大肠杆菌表达平台在表达包括可溶性蛋白、包涵体、融合蛋白等拥有丰富的经验,能专业解决蛋白表达中的各种瓶颈,到目前为止,已为全球各地客户提供超过3000种蛋白。


客户只需提供:1)目的蛋白信息或基因序列;2)蛋白询价信息表。


最终交付:1)蛋白纯品,纯度90%以上;2)表达产物检测报告,包括测序报告、实验条件、蛋白表达、纯化图谱等。


关于金开瑞:
武汉金开瑞生物工程有限公司,围绕功能蛋白质组学研究,致力于为全球制药企业、诊断试剂企业、科研试剂研发企业、高校和科研院所以及大型医院提供研究技术服务。
关注蛋白整体研究思路,围绕蛋白的读、解、写、用,金开瑞建立起蛋白组、基因服务、病毒包装、抗体制备等技术平台。所有平台的实验室及技术团队都坚持自主建设,各平台技术负责人都有5年以上相关领域的工作经验,可以最大程度的保障了项目按时保质的实施。完整的技术平台及专业的技术团队,保证了金开瑞不仅可以提供单一项目的技术服务,还可以提供miRNA,lncRNA,蛋白质组学相关等多种整合性项目服务。


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