TUNEL检测

TUNEL是一种经典的细胞凋亡检测方法，凋亡细胞会发生DNA双链断裂，从而在断裂处暴露出3’-OH基团，利用荧光/化学基团标记的dUTP与3’OH基团结合后，可通过荧光成像/染色反应指示凋亡细胞。

技术原理：

细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测，可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时，暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上荧光素 (FITC) 标记的dUTP (fluorescein-dUTP) ，从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测，这就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法检测细胞凋亡的原理。

结果展示：

用待研基因shRNA慢病毒感染A549细胞，TUNEL染色，结果显示，shRNA下调目的基因表达后，凋亡细胞显著增多，表明待研基因与A549细胞凋亡显著相关。

参考文献：

1.Wyllie, A. H. etal. (1980) Cell death: the significance of apoptosis. Int Rev Cytol.1980;68:251-306.

2.gorczyca, w. etal. (1993)；Induction of DNA strand breaks associated withapoptosis during treatment of leukemias. leukemia 7, 659-670.

3.Gold, R. etal. (1994);Differentiation between cellular apoptosis and necrosis bythe combined use of in situ tailing and nick translation techniques.Lab. Invest. 71,219.

TUNEL检测信息由上海吉凯基因医学科技股份有限公司为您提供，如您想了解更多关于TUNEL检测报价、型号、参数等信息，欢迎来电或留言咨询。

注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途