SILAC

背景简介：

    SILAC( Stable Isotope  Labeling with   Amino acids in  Cell culture)技术是依据细胞生长对必需氨基酸的依赖原理，利用稳定同位素标记( 13C，15N，2H)的必需氨基酸对细胞蛋白质组进行代谢标记的方法；13C,15N,2H是稳定同位素，没有放射性，因此可以在常规条件下进行试验。

    Arg(R)、Lys(K)、Leu(L)是SILAC常用的氨基酸。将(13C，15N，2H)等稳定同位素标记的R、K、L加入细胞培养基中，在细胞进行蛋白质合成时，这些稳定同位素标记的氨基酸自然被“掺入”到蛋白质中。通过>6代的细胞增殖，整个细胞的蛋白质组会被 

稳定同位素氨基酸”标记”；

     SILAC“标记”了蛋白质与“未标记”的蛋白质（普通培养基培养）存在数目的质量差异，该质量差异在后续LC-MS的质谱( MSl)中呈现一对同位素质谱峰，通过质谱峰的信号强度能实现对2组样品中每一个蛋白质表达水平的定量，终能确定蛋白质表达水平差异（差异蛋白质组学分析）和区分特异性和非特异性相互作用（蛋白质相互作用分析）；同时通过质谱( MS/MS，MS2)实现对样品中蛋白质的鉴定。

     SILAC技术结合LC-MS能同时实现对2组样品中蛋白质的定性和定量分析。通过定墨信息能直接反映出样品之间的蛋白质表达水平差异，便于快速找到感兴趣的目标分子。同时，利用SILAC技术，能明显提高文章的档次。

SILAC氨基酸对照表：

SILAC实验设计：

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注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途