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参考报价: | 面议 | 型号: | Chip检测 |
品牌: | 基尔顿 | 产地: | 上海 |
关注度: | 13 | 信息完整度: | |
样本: | 典型用户: | 暂无 |
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Chip检测实验操作流程:
1 、样品准备与交联
细胞收集后,用37%的formaldehyde处理细胞,交联核酸与DNA结合蛋白;
2. 超声打断染色质
裂解细胞,用Bioruptor将染色质超声破碎成200-1000bp片断;将片段分为两份,一份用于免疫共沉淀,一份用于对照。
3 、免疫共沉淀 (IP)
取B步骤所得一份片断与ChIP特异抗体结合进行免疫共沉淀,利用免疫磁珠法富集抗体复合物。
4 、解交联及纯化 DNA
将富集的DNA/蛋白复合物解交联释放DNA片段,并进行纯化(IP DNA);B步骤所得用于对照(Input DNA)的片断作不进行IP实验,但也要解交联并纯化。
5 、 DNA 段 PCR 扩增
针对ChIP DNA, Input DNA及对照DNA的目的片段设计特异性引物并进行荧光定量PCR扩增。
6 、结果分析
%Input=2(CtInput-CtChIP)×Fd×100%
Fold Enrichment = [%(ChIP/Input)] / [%( Negative control/Input)]
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注:该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案,不可用于临床诊断或治疗等相关用途