噬菌体展示文库构建服务

噬菌体展示多肽库筛选

噬菌体展示（Phage Display）技术是一种基因表达产物和亲和选择相结合的技术，以改构的噬菌体为载体，把待选基因片段定向插入噬菌体外壳蛋白质基因区，使外源多肽或蛋白质表达并展示于噬菌体表面，进而通过亲和富集法表达有特异肽或蛋白质的噬菌体。应用噬菌体展示，可合成、筛选到许多想要的蛋白（如融合肽、抗体、酶）。这些蛋白具有预期的催化特性或结合亲和力，或者具有用于胞内、胞外诊断、人体疾病免疫治疗和生物催化作用时所需的特异性。

噬菌体展示多肽文库操作流程：ewebeditor/fckup/2012/4/20120420094255702153.jpg

是生物淘选（biopanning）。以单克隆抗体筛选蛋

白质抗原表位为例，其基本技术流程如下：将单抗

包被聚乙烯平皿后，再加入噬菌体展示肽库，使其

充分与单抗反应后，洗去未结合的游离噬菌体，再用

洗脱液将结合状态的噬菌体洗脱下来。将其浸染宿主

大肠杆菌扩增后回收，再进行下一轮筛选。通常经过

3、4轮的筛选，并且每次增加筛选强度，这样就可获

得与单抗结合较紧密的噬菌体克隆。通过序列测定和分

析，就能推知该噬菌体克隆所携带的外源短肽序列，

从而确定该单抗所针对的抗原表位。

噬菌体展示技术的优点：

噬菌体展示技术作为一种新兴的研究方法和工具，在蛋白质结构研究上已广泛应用。

1、高通量的淘选

2、可用于模拟表位的筛选。

3、易于纯化：重组噬菌体的纯化步骤简单、不要求昂贵的试剂与设备，在一般的实验室条件下就可以完成。

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