免疫共沉淀（Co-immunoprecipitation，Co-IP）技术是以抗体和抗原之间的作用为基础的，用于研究蛋白质相互作用的方法。原理是以细胞内源性靶蛋白为诱饵，将靶蛋白抗体与细胞总蛋白进行共孵育，促进免疫复合物的形成。随后加入能够与靶蛋白抗体结合的protein A/G，形成“结合蛋白-靶蛋白-靶蛋白抗体”复合物。免疫复合物经纯化后进行凝胶电泳分离，结合Western blot 或质谱技术，进而达到纯化目的蛋白质、定性检测抗原或抗体的目的。与其它研究方法相比，免疫共沉淀在生理条件下检测蛋白质之间的相互作用，因此，不仅可以检测到体内形成的复合体，而且可排除过表达靶蛋白所带来的假阳性。其次内源性的靶蛋白质是加工、修饰和成熟的蛋白质，因此，依赖于修饰的蛋白质相互作用也能被检测到。

免疫共沉淀原理图

服务内容
•  标签蛋白的免疫共沉淀 (Myc-tag, Flag-tag, HA-tag)
•  非标签蛋白的免疫共沉淀 (Native protein)
•  染色质免疫共沉淀（Chip-IP）

技术流程
•  构建相关真核表达载体，转染细胞并获得表达；
•  蛋白质抽提与定量；
•  免疫沉淀（以normal IgG作为对照）；
•  免疫沉淀产物SDS-PAGE和western blot分析；
•  技术服务实验报告提交。

客户需准备的材料
•  组织、细胞、蛋白质溶液等样品，待测蛋白的相关信息等；
•  如需构建基因的过表达载体，则还需提供过表达载体及其相关信息；
•  其他与免疫沉淀相关信息。

实验报告内容
•  免疫沉淀产物，电子图片及分析结果；
•  蛋白质鉴定结果，SDS-PAGE及western blot分析结果；
•  实验步骤、使用仪器等。

核酸与蛋白互作研究订单表

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