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参考报价: | 面议 | 型号: | 暂无 |
品牌: | 吉满生物 | 产地: | 暂无 |
关注度: | 16 | 信息完整度: | |
样本: | 典型用户: | 暂无 |
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该服务根据客户构建好的表达载体,并参考客户提供的实验方案,如温度、IPTG诱导浓度及表达时间,选择合适的E.coli菌株进行目的蛋白诱导表达并纯化。如果客户还没有构建好表达载体,我们也可以帮您将目的基因插入到特定的表达载体中,并摸索蛋白表达的zei优条件。各项服务需额外加付少许费用。表达出的目的蛋白进行SDS-PAGE电泳和Western blot分析。
具体内容
服务步骤 |
具体内容 |
交付内容 |
交付时间 |
目标基因亚克隆(可选) |
1. 扩增并抽提含有目的基因的载体质粒。 2. 将目的基因亚克隆到合适的表达质粒上。 3. 测序验证构建质粒的准确性。 |
正确构建的重组表达质粒,含重组质粒的DH5α菌株及测序报告。 |
2-3周 |
E. coli 表达菌株转化及筛选 |
1. 扩增并抽提构建好的表达质粒。 2. 将表达质粒转化到高效的E. coli表达菌株中。 3. 至少挑选3个阳性克隆于LB培养基中扩增并选择合适的条件,SDS-PAGE 检测蛋白表达情况,筛选出合适菌株。 |
重组质粒的表达菌株及表达检测报告 |
2-3周 |
目的蛋白的诱导表达及纯化 |
1. 对蛋白表达时间,温度以及IPTG浓度等表达条件进行优化,并诱导表达目的蛋白。 2. 摇瓶培养1L重组细菌,通过亲和层析,离子交换,疏水及凝胶过滤等方法纯化表达的重组蛋白。 4. 通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制zei终产品质量。 5. .通过Western-blot验证目标蛋白正确性。 |
≥1mg纯化好的目的蛋白及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签或去除纯化标签的目的蛋白,纯度zei高可达95%以上。 |
2-3周 |
服务说明
1. 如果客户自己已经有构建好的表达载体,须提供我们≥1ug的抽提质粒,而且该表达载体须已做过转化和表达,证明有目的蛋白表达。或直接提供我们有目的蛋白表达的新鲜或保存菌株。
2. 如果客户需要我们帮助构建表达载体,须提供我们含有目的基因片段的PCR产物或者已经连接到(TA)或其它克隆载体上的质粒(≥1ug)或菌液。
3. 表中的交付时间是我们的标准服务时间,如果客户还需蛋白复性等后续服务,服务时间需适当延长,但我们会尽zei大努力以zei快的速度完成我们的服务。
原核蛋白表达与纯化信息由吉满生物科技(上海)有限公司为您提供,如您想了解更多关于原核蛋白表达与纯化报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。
注:该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案,不可用于临床诊断或治疗等相关用途