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测序服务

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技术服务-上海闪晶分子生物科技有限公司
 
 
荧光定量PCR 多肽合成
 
DNA测序服务 DNA合成服务
 
DNA克隆 全基因人工合成服务
 
基因突变 5-RACE 3-RACE
 
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DNA 测序服务
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DNA 测序原理

DNA 测序技术主要依据 Sanger 的双脱氧链终止法。以 DNA 单链为模板,在特定条件下,用特异的引物在测序级 DNA 聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则,不断将 4 种脱氧核糖核苷酸 (dNTP) 加到引物的 3- 羟基末端并使引物链得到延伸。这种链的延伸是通过引物的 3- 羟基和脱氧核糖核苷酸底物的 5- ***酸基团形成***酸二酯键来完成的。如果这种反应体系中加入双脱氧核糖核苷酸 (ddNTP) ,这种 23ddNTP 的 5- ***酸基团是正常的 (4 种不同的荧光标记 ) ,而 3 位置缺少羟基,因此在 DNA 聚合酶作用下,仍然可以通过 5- ***酸基团与引物链的 3- 羟基反应掺入到引物链中,但是由于 ddNTP 没有 3- 羟基,不能继续与下一个 5- ***酸基团形成***酸二酯键而导致引物链延伸的终止。这样,在测序反应体系中, DNA 引物链不断合成与偶然终止,产生一系列的长短不等的核苷酸链,然后将这些反应产物进行电泳,即可得测序图谱。

样品要求

样品类型

相应要求

 

 

菌体

1. 说明载体抗性类型,我们提供 Amp, Kan, Tet 及 Chl 四种抗生素。
2.   提供 1ml 左右过夜培养的菌液,加 15 灭菌甘油,于 Eppendorf 管中封口保存,防止交叉污染或渗漏。
3.   大量样品测序,建议在一次性塑料培养皿固体培养基上穿刺培养。
4.   建议尽量提供穿刺培养的菌种。

 

质粒

1. 质粒溶于适量体积双蒸水中(不含 TE ),电泳检测总量大于 2mg 。

2. 建议用相关试剂盒纯化。
3. 如有可能,同时提供 1ml 含有相应质粒的菌液备用。
4. 大质粒必需注明载体长度。

 

未纯化 PCR 产物

1. 片段大于 150bp 。
2. 提供 50ul ~ 100ul PCR 扩增产物 ( 总量 500ng-1ug) 。
3. 取 3ul 样品,电泳检测应为明亮的一条带,无杂带。

 

纯化 PCR 产物

1.PCR 产物溶于双蒸水中(不含 TE )。

2. 浓度大于 20ng/ul ,体积大于 20ul ,长片段需适当增加量。
3. 电泳检测条带专一。

自备的引物

1. 浓度不低于 5pmole/ul( 或 5umol/L) ,体积大于 20ul 。
2. 随机引物和简并引物不能用于测序。
3. 尽可能提供引物全序列、 PCR 退火温度,以供参考。

 

测序服务信息由上海闪晶分子生物科技有限公司为您提供,如您想了解更多关于测序服务报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。

注:该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案,不可用于临床诊断或治疗等相关用途

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