Real Time PCR检测技术服务

01 服务项目

a 绝对定量

b 相对定量

c RNAi干扰效果确认（siRNA的筛选）

d 定性分析（SNP分型解析等）

02 检测方法

SYBR Green Ⅰ嵌合染料法、TaqMan 探针法、Cycling探针法等。

03 Real Time PCR装置

使用美国STRATAGENE公司的 Mx3000P^TM实时荧光定量PCR仪。

一、    

1. 绝对定量

绝对定量首先必须构建与检测样品目的基因具有相同序列的标准品，使用已知浓度的标准品制作5个点以上的标准曲线后，对未知浓度的检测样品进行绝对量（起始拷贝数）分析。

实验例子：对于人的IL-22R1基因在上皮细胞中的表达情况进行绝对定量。

Target：Human IL-22R1

扩增长度：120bp

朗日使用的实验仪器：Mx3000P^TM实时荧光定量PCR仪或ABI公司的ABI7300仪

2. 相对定量（mRNA表达量分析）

基因表达研究一般采用相对定量的方法。相对定量法必须对样品的目的基因和参比基因同时分别进行定量，通过对参比基因的实时检测，可以对样品之间由于起始细胞数不同、或RNA提取效率的不同等造成的RNA表达量误差进行校正，真正达到在严格意义上对样品之间的m RNA表达差异进行分析的目的。

实验例子：通过实时荧光定量PCR的方法，采用SYBR Green Ⅰ嵌合染料法，以GAPDH为内参基因，对于COL3A

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注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途