RACE服务

服务简介

RACE是基于PCR技术由已知的部分cDNA顺序来获得完整cDNA5′和3′端的方法。分离和克隆基因是研究基因结构、功能以及表达的基础，通过建立和筛选cDNA文库来分离克隆目的基因的经典方法繁琐而且工作量大，而RACE则可以简单而有效的从低丰度转录本中快速扩增cDNA末端，从而获得目的基因全长cDNA序列。Invitrogen采用GeneRacer 试剂盒确保只有5’具有帽子结构，3’具有polyA全长cDNA才能扩增。

RACE原理

要获得cDNA3′末端, 以OligodT锚定引物为引物反转录总RNA得到cDNA，接着用SP5和PCR锚定引物进行PCR循环即可扩增得到cDNA链。扩增的特异性取决于SP5的碱基与目的cDNA分子互补。要获得cDNA5′末端，利用基因特异性引物SP1反转录总RNA, 分离反转录产物,用脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)加上poly(A)尾。以d(T)锚定引物和位于延伸引物序列上游的基因特异性扩增引物SP2进行PCR扩增。再用PCR锚定引物和特异性巢式引物SP3进行第二轮PCR扩增。将PCR产物克隆进质粒载体，进行测序。zei后,从两个有相互重叠序列的3′和5′RACE产物来获得全长cDNA,或者通过分析RACE产物的3′和5′末端顺序,合成相应引物进行PCR扩增mRNA反转录产物来获得。

服务流程

1、总RNA提取

2、已知序列验证：依据客户提供的序列设计引物扩增，验证参考序列的存在及方向

3、5’和3’RACE

4、对获取的序列进行测序验证

客户提供

材料要求新鲜、RNA不能降解，总RNA样品不少于10μg

服务结果

1、构建好5’和3’RACE的TA克隆

2、产物SDS-PAGE图谱，产物测序结果

3、详细实验流程及反应条件

服务质量

获取的5’和3’RACE序列与已知序列连续存在于同一条cDNA片段上。

RACE服务信息由武汉言行生物科技有限公司为您提供，如您想了解更多关于RACE服务报价、型号、参数等信息，欢迎来电或留言咨询。

注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途