RAD-Seq

基于酶切的简化基因组测序（RAD-Seq，Restriction-site Associated DNA Sequence）是对与限制性核酸内切酶识别位点相关的DNA进行高通量测序，可大幅降低基因组的复杂度，降低建库和测序成本，操作简便，同时不受参考基因组的限制，可快速鉴定出高密度的SNP位点，实现遗传进化分析及重要性状候选基因的预测。RAD-Seq尤其适合于大样本量的研究，可以为利用全基因组重测序技术做深度信息挖掘奠定坚实的基础。与传统芯片分型技术相比，RAD-Seq可以检测基因组上未知变异点中新的SNP，发掘新的和稀有的变异。RAD-Seq技术可广泛应用于变异检测、遗传图谱构建、功能基因挖掘、群体进化等研究，具有重大的科研和产业价值。

基于RAD-Seq的变异检测，利用RAD-Seq对某一物种个体或群体的基因组进行测序及差异分析，可获得SNP、InDel等大量的遗传多态性信息，建立遗传多态性数据库，为后续揭示进化关系、功能基因挖掘等提供理论基础。

基于RAD-Seq的遗传图谱的构建，对酶切获得的RAD tag进行高通量测序，可以获得RAD tag上的SNP。可广泛应用于遗传图谱的构建，从而为后续的QTL定位奠定基础。

    基于RAD-Seq的群体进化分析，对物种的各亚种进行RAD测序获得基因组信息，通过与RAD tag组装出的参考序列或参考基因组序列进行比对，获得大量高准确性的SNP变异信息，以进化群体遗传学分析。

技术路线

技术流程

技术参数

样品要求

一、变异检测：

1. DNA样品量≥3 ug；

2. EcoRI（GAATTC）酶切；

3. 推荐测序深度≥1X/个（组装样本的测序深度≥5X）；

二、遗传图谱：

1. DNA样品量≥3 ug；

2. 测序深度：亲本2-5X，子代0.8X/个（F1、F2等临时性群体）0.6X/个（RIL、DH等永久性群体）；

3. 适用范围：单倍体或者二倍体物种，所有作图群体（F1、F2；RIL、DH等），群体大小在100个以上；

三、群体进化：

1. DNA样品量≥3 ug；

2. 测序深度：≥1X/个（组装样本的测序深度5X）

3. 适用范围：单倍体或者二倍体物种中不同亚群，各亚群间划分明显，同一亚群内的个体有一定代表性，每个亚群选取10个样本左右（动物≥10个，植物≥15个），总体不少于30个样本；

四、样品细则：

1. DNA样品：请提供浓度＞100 ng/μl，总量＞3μg的DNA，OD 260/280介于1.8-2.0之间，并确保DNA无降解，电泳检测无明显RNA条带，基因组条带清晰、完整，主带应在100kb以上。若样品中有多糖、糖蛋白的残留，对打断DNA样品带来非常大的困难，且很难去除，因此特别要求所提供的样品不要有多糖或糖蛋白污染。

2. 植物样品：选取植物幼嫩组织，每个样品重量＞500mg，干冰或者液氮保存寄送。

3. 动物样品：要求新鲜动物组织，避免脂肪组织，每个样品重量＞50mg。对于一般物种应挑选肝脏、肾脏、血液等组织取样，对于珍贵物种请提供耳样、毛发（带毛根）等脂肪含量较少的组织进行取样。为了减少个体差异对后续拼接产生的影响，尽量从同一个个体中取样。若物种体积较小，从一个个体中提取的DNA量不能满足测序实验所需，在保证量的前提下，应尽量减少采样个体的数量。提供组织样品应＞50 mg，尽量提供较多量，不同的物种DNA提取产量有差异。

4. 样品运输：送样管务必标清样品编号，管口使用Parafilm膜密封，样品请用干冰或者冰袋运输。干冰运输时间不要超过72小时；冰袋运输，时间zei好不要超过24小时。样品保存期间切忌反复冻融。

RAD-Seq信息由奥明（杭州）基因科技有限公司为您提供，如您想了解更多关于RAD-Seq报价、型号、参数等信息，欢迎来电或留言咨询。

注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途