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靶向LC-MS代谢组
产品定义
靶向代谢组学分析主要是以标准品为参照,对特定的代谢物群进行有针对性地、特异性地检测与分析。通常采用的技术方案包括常规的液质联用(LC-MS)分析技术,以及选择性反应/多反应监测技术(MRM/ SRM)。
技术原理
常规分析法首先利用LC-MS的方法对待分析样本进行大规模代谢组分析,然后通过与相同分析条件下标准品的分析结果进行比对,实现对样本内目标代谢群的定性和定量分析。
MRM/SRM技术是更为特异、灵敏的靶向分析方法。其主要基于已知或假定的反应离子信息,有针对性地选择数据进行质谱信号采集,对符合规则的离子对进行信号记录,去除不符合规则离子信号的干扰。定量过程中,该技术首先筛选到目标代谢物特异性的母离子,然后选择性地对这些母离子进行碰撞诱导,去除其他离子的干扰,只对选定的特异MS/MS2离子进行质谱信号的采集,从而实现对目标代谢分子更为特异、灵敏、准确的分析。
代谢物 分子离子 LC/ESI MS CID selection Transition
实验流程(MRM)
使用仪器
常规分析法:AB SCIEX Triple TOFTM 5600
MRM/SRM:AB SCIEX Triple Quad™ 5500
液相色谱柱
C18反相柱、HILIC亲水柱
技术优势
常规分析法:高通量分析能力,相比于MRM/SRM简便、经济
MRM/SRM:高通量分析能力,兼具高选择性、高特异性、高准确度、高重现性、高灵敏度、宽动态范围
应用领域
∴ 非靶向代谢物组学结果的验证
∴ 代谢相关生理、病理研究
∴ 发酵工艺研究
∴ 食品科学与营养学研究
技术参考案例
[1] Wei R, Li G, et al. High-throughput and multiplexed LC/MS/MRM method for targeted Metabolomics. Anal Chem. 2010; 82(13):5527-33.
[2] Roberts LD, Souza AL, et al. Targeted metabolomics. Curr Protoc Mol Biol. 2012; Chapter 30:Unit 30.2.1-24.
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