吐露港提供EMSA（凝胶阻滞）技术服务

服务简介 

凝胶阻滞或电泳迁移率实验（EMSA）是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。这一技术zei初用于研究DNA结合蛋白，目前也广泛用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保温，在非变性的聚丙烯凝胶电泳上，分离复合物和非结合的探针。DNA-复合物或RNA-复合物比非结合的探针移动得慢。同位素标记的探针依研究的结合蛋白的不同，可是双链或者是单链。当检测如转录调控因子一类的DNA结合蛋白，可用纯化蛋白，部分纯化蛋白，或核细胞抽提液。在检测RNA结合蛋白时，依据目的RNA结合蛋白的位置，可用纯化或部分纯化的蛋白，也可用核或胞质细胞抽提液。反应体系中常加入随机打断的鲑鱼精DNA或polydI-dC来防止非特异性竞争；亦可以添加未标记的DNA或RNA探针，进行特异性竞争实验以确定该结合是特异性的。

吐露港生物科技有限公司目前提供EMSA技术服务。吐露港生物汇聚了一批分子生物学领域的技术专家，开发了采用荧光标记探针DNA的技术，可以更灵敏地检测EMSA结合情况。相比于传统的同位素标记、地高辛标记以及生物素标记，荧光法标记的优势非常明显。

服务优势

1. 安全环保：荧光法标记由于不使用同位素，因此，该方法对环境非常友好，也更安全；

2. 快捷真实：相比于地高辛和生物素标记，荧光法标记的探针由于不需要Western-blot杂交等信号放大过程，可以通过仪器直接读取信号，因此，所读取的信号强度更加真实，而且速度上更快。

服务流程

说明：如质检不通过，我们将停止实验；在与客户充分沟通并确定新的实验方案后，我们可以继续进行测试。

样品要求

1，提供纯化的蛋白：纯化的蛋白纯度要在90%以上（经SDS-PAGE只有电泳一条带）。如果纯度不够，或者有杂带的话，可能会影响后续实验结果的分析。例如，不能确定到底是目的蛋白与靶标DNA结合还是杂蛋白与靶标DNA结合；同时，也不能确定杂蛋白是否会影响目的蛋白结合靶标DNA的能力。同时，蛋白浓度不应低于0.3 mg/mL。

2，提供组织样本：若客户自己抽提蛋白，则应保证蛋白浓度不低于1mg/mL。吐露港公司亦可以提供蛋白抽提服务，具体收费标准见“服务收费”部分。

3，提供质粒DNA：要求客户将靶标DNA克隆到通用载体上，如吐露港的pUC18B-T载体或者TakaRa公司的pMD18-T等，经过测序无误后方可进行后续的探针制备和EMSA实验。吐露港提供载体构建服务，具体收费标准见“服务收费”部分。

收费标准

注明：

1，一般来讲，我们制作可用于发表的EMSA图片时，会选择3个蛋白浓度梯度（从0开始），并在反应体系中添加防止非特异性竞争的polydI-dC或者打碎的鲑鱼精DNA。如果客户需要添加特异性的cold probe竞争（冷探针竞争），则需要另付500元费用；如果还需要添加蛋白特异性抗体以进行super-shift实验的话，则也需要另付500元费用（一般来讲，对于组织样本的EMSA反应，添加特异蛋白的抗体比较重要；而对于纯化的蛋白，则一般不需要；抗体需要客户自己提供，或由吐露港代为购买）。

2，靶标探针的克隆和目的蛋白的表达载体构建可以同步进行；一般整个实验周期在10个工作日左右。如有特殊情况，请联系我们的技术人员（support@tolobio.com）；我们将和您共同制定一套加急方案，但是需要收取加急费用（原来费用的1.5倍）。

3，若EMSA的质检不合格，我们仍将收取质检费用（按次收取），并提供相应的质检报告。

4，对于吐露港提供的任何结果，我们均保证其可重复性。若投稿时，reviewer提出任何关于图片质量方面的问题，吐露港将负责解答并提供相应的解决方案。我们的宗旨是：负责到发表！

电泳迁移率检测服务（EMSA）信息由上海吐露港生物科技有限公司为您提供，如您想了解更多关于电泳迁移率检测服务（EMSA）报价、型号、参数等信息，欢迎来电或留言咨询。

注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途