蛋白质修饰位点鉴定

     蛋白质氨基酸序列的特定位置可以与化学基团或者小分子量的蛋白共价结合从而发生蛋白质翻译后修饰(post-translational modifications，PTMs)，相较于没有发生修饰的蛋白，PTMs会导致特定序列分子量的增加。鉴定原理：蛋白质首先被酶切成肽段，通过质谱分析，得到一系列肽段的分子质量信息。对于某一个特定肽段而言，在没有发生任何翻译后修饰的情况下，其序列信息和分子量是确定的。当它发生了某种翻译后修饰之后，例如磷酸化修饰，由于序列信息和分子量是确定的，磷酸根的分子量也是确定的；在质谱检测过程中发现其中的部分肽段的分子量刚好增加了一个或者数个磷酸根的分子量；再通过二级质谱图，根据相邻的y和b离子之间的质量数差（刚好相差80Da，正好等于一个磷酸基团质量）进行确认。

      基于液相质谱LC-MS/MS分析能够精确测定蛋白质或多肽分子质量这一特性，可检测蛋白质位点上发生的多种翻译后修饰，例如：磷酸化、糖基化、乙酰化、泛素化、琥珀酰化、甲基化、蛋白剪切位点等等。

▶ 蛋白剪切：蛋白质存在蛋白前体，需被剪切后往往才能表现活性，剪切位点鉴定尤其重要；
▶ 磷酸化：信号转导、细胞周期、生长发育及癌症机理等；
▶ 糖基化：蛋白质折叠、更新以及免疫应答等；
▶ 乙酰化：基因表达调控、细胞凋亡、细胞代谢、蛋白质稳定性以及神经退行性病变等；
▶ 泛素化：细胞周期、细胞凋亡、转录调控、DNA修复以及信号转导等；
▶ 甲基化：染色质结构及转录调控等；
▶ 丙酰化 / 丙二酰化 / 戊二酰化 / 琥珀酰化：主要存在于线粒体和细菌中，与代谢过程密切相关。

      本中心作为广东省第一家专业的蛋白质组学研究中心，也是广东省蛋白质组学转化医学重点实验室，在蛋白质翻译后修饰位点鉴定方面积累了较为丰富的实践经验，欢迎咨询合作，微信详聊LH417826085。蛋白质条带样本只需常温运输，蛋白液体需低温运输，同时需提供样本基本信息和物种，鉴定周期为1-2周。包括样本处理、质谱数据采集、数据库检索报告，修饰位点鉴定。

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