基因的功能研究可分为loss-of-function和gain-of-function，即通过过表达该基因和抑制内源基因的表达的手段来研究某个基因的生物学功能。常规转染技术可分为两大类，一类是瞬时转染，一类是稳定转染（永久转染）。
 
瞬时转染

原理：
通过脂质体介导转染法及电穿孔等基因转染技术，将靶基因导入细胞，一般在转染后48小时左右，靶基因即可在细胞内表达。根据不同的实验目的，48小时后即可进行靶基因表达的检测等实验。
应用：
    观察目的基因及其表达蛋白在某种细胞中的功能（短时间即可进行观察，但效应会很快丢失）

服务流程：
1）细胞接种：转染实验前天接种细胞，各种细胞的平板密度依据各种细胞的生长率和细胞形状而定。进行转染当天细胞密度应达到60%~80%覆盖
2）细胞转染（脂质体、电穿孔、FuGENE 6等）
3）48小时以后鉴定目的基因的表达情况
客户提供：
1，构建好的外源基因载体，或目的基因基本信息
2，待转染的细胞系（1×10⁶个细胞，可传代，倍增时间小于48小时）以及细胞培养条件的说明
3，若需要检测靶基因的表达，请提供相应抗体
 
伯信生物提供：
构建好的瞬时转染细胞及相关的外源基因表达分析
 
稳定转染细胞株的构建

原理：
稳定转染，就是转染的质粒DNA整合到宿主细胞染色体上，使宿主细胞可长期表达目的基因及蛋白。需要在瞬时转染基础上对靶细胞进行筛选或者应用高转染效率的病毒，根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物进行细胞传代，从而得到可稳定表达目的基因的细胞系。

应用：
    观察目的基因及其表达蛋白在某种细胞中的功能（稳定，可长期进行研究）

服务流程：
1） 筛选浓度测定：以10~14天细胞全部死亡的抗生素浓度为筛选浓度
2） 细胞接种：转染实验前天接种细胞，各种细胞的平板密度依据各种细胞的生长率和细胞形状而定。进行转染当天细胞密度应达到60%~80%覆盖
3）细胞转染（病毒、脂质体、电穿孔、FuGENE 6）
4）利用质粒上含有的抗性选择进行筛选
5）鉴定筛选结果

客户提供：
1，构建好的外源基因载体
2，待转染的细胞系（1×10⁶个细胞，可传代，倍增时间小于48小时）以及细胞培养条件的说明
3，若需要检测靶基因的表达变化，请提供相应抗体

伯信生物提供：
构建好的稳定表达细胞系及相关的外源基因表达分析

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