RAPD及SRAP、ISSR技术

一．RAPD技术简介

运用随机引物扩增寻找多态性DNA片段可作为分子标记。这种方法即为RAPD(Random amplified polymorphic DNA，随机扩增的多态性DNA)。尽管RAPD技术诞生的时间很短，但由于其独特的检测DNA多态性的方式以及快速、简便的特点，使这个技术已渗透于基因组研究的各个方面。

RAPD技术建立于PCR技术基础上，它是利用一系列(通常数百个)不同的随机排列碱基顺序的寡聚核苷酸单链(通常为10聚体)为引物，对所研究基因组DNA进行PCR扩增。聚丙烯酰胺或琼脂糖电泳分离，经EB染色或***性自显影来检测扩增产物DNA片段的多态性，这些扩增产物DNA片段的多态性反映了基因组相应区域的DNA多态性。二. SRAP技术简介

相关序列扩增多态性(Sequence—related amplified polymorphism，SRAP)是一种新型的基于PCR的标记系统，为显性标记，是由美国加州大学蔬菜系Li与Quiros博士于2001年在芸薹属作物开发出来。该标记通过独特的双引物设计对基因的ORFs(Open reading frames开放阅读框)的特定区域进行扩增，上游引物长17bp，对外显子区域进行特异扩增。下游引物长18bp，对内含子区域、启动子区域进行特异扩增。因不同个体以及物种的内含子、启动子与间隔区长度不同而产生多态性。该标记具有简便、高效、产率高、高共显性、重复性好、易测序、便于克隆目标片段的特点。目前已成功地应用于作物遗传多样性分析、遗传图谱的构建、重要性状的标记以及相关基因的克隆等方面。

三. ISSR技术简介

ISSR ( inter simple sequence repeat) 又称简单重复序列间扩增，是近年来发展起来的一类新型的分子标记技术。该技术根据植物基因组中丰富的简单重复序列设计单一引物,对基因组DNA进行扩增,利用了RAPD技术的优点和基因组中丰富的SSR序列信息,具有操作简单、可靠性强、重复性高、DNA模板用量少、不需预先设计引物的特点,可用来揭示样本间的遗传多样性。

四．客户提供：

★基因组DNA：

   ●至少15μL样品，浓度为50-100ng/μL；

   ●2%琼脂糖电泳检测有DNA主带，没有降解；

   ●DNA经过DNA纯化试剂盒或磁珠纯化；

   ●DNA需溶解在TE或灭菌的去离子水里；

   ●DNA溶解后，肉眼看不到杂色；

★植物材料：新鲜组织，叶片采用硅胶干燥后或干冰运输；

★动物材料：新鲜组织，无水乙醇封存低温运输；

RAPD及SRAP、ISSR技术信息由博友顺生物技术有限公司为您提供，如您想了解更多关于RAPD及SRAP、ISSR技术报价、型号、参数等信息，欢迎来电或留言咨询。

注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途