甲基化检测——实验报告单-甲基化检测方法

规格：MSP，价格：RMB 300

规格：BSP，价格：RMB 800

背景知识：

DNA甲基化是最早发现的DNA修饰途径之一，大量研究表明，DNA甲基化能引起染色质结构、DNA构象、DNA稳定性及DNA与蛋白质相互作用方式的改变，从而控制基因表达。DNA甲基化主要形成5-甲基胞嘧啶（5-mC）和少量的N6-甲基嘌呤（N6-mA）及7-甲基鸟嘌呤（7-mG）。结构基因含有很多CpG结构，2CpG和2GpC中两个胞嘧啶的5位碳原子通常被甲基化，且两个甲基集团在DNA双链大沟中呈特定三维结构。基因组中60%～ 90%的CpG都被甲基化，未甲基化的CpG成簇地组成CpG岛，位于结构基因启动子的核心序列和转录起始点。DNA的甲基化修饰是基因表达调控的一种重要手段。

主要检测方法及原理:

测序法是建立在MSP基础上进一步深入研究CpG岛各个位点甲基化情况的方法。使DNA中未发生甲基化的胞嘧啶脱氨基转变成尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶保持不变，行PCR扩增（引物设计时尽量避免有CpG，以免受甲基化因素的影响）所需片段，则尿嘧啶全部转化成胸腺嘧啶。最后，对PCR产物进行测序，并且与未经处理的序列比较，判断是否CpG位点发生甲基化。

BSP检测流程图

技术优势：此方法一种可靠性及精确度很高的方法，能明确目的片段中每一个CpG位点的甲基化状态。在寻找有意义的关键性CpG位点上，有其他方法无法比拟的优点。限制性：每次至多能够检测450 bp内的基因甲基化状态。

甲基化特异性的PCR

甲基化特异性是一种特异位点甲基化检测技术。其基本原理是处理基因组DNA，未甲基化的胞嘧啶变成尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不变。因此从理论上讲，用不同的引物做PCR，即可检测出这种差异，从而确定基因有无CpG岛甲基化。

技术优势：这是检测基因甲基化的经典方法，是一种简便的、特异的、敏感的检测单基因甲基化的方法。可以用于高通量样品基因特异位点甲基化的检测。限制性：因采用甲基化特异性引物进行PCR，该方法一次只能检测一个位点。

样品准备条件：

细胞样品：收集细胞后放入液氮中速冻保存或速冻24 h后转入-80 °C冰箱保存。

组织样品：动物组织一般取材后立即放入液氮中速冻保存，液氮冻存24 h后可转入-80 °C冰箱保存。特殊组织（植物等）建议直接进行甲基化检测实验。

所有样品的处理和保存过程中，切忌反复冻融。

样品运输条件：样品运输条件根据实验样品的处理条件，可以选择液氮或者干冰运输。

您只需提供：

新鲜且足量的样品（组织不少于50 mg，细胞不少于107，全血不少于500 μl），或纯化好的符合实验要求的DNA（≥ 5 μg/样），检测的基因信息，相关文献等。

我们提供：

实验报告单，MSP电泳图/BSP测序图等。

公司介绍：    

广州维伯鑫生物科技股份有限公司是一家从事生物医学科研技术服务和产品的高科技公司，坐落于广州科学城国家级科技企业孵化器内。搭建了完善的实验平台，包含2个标准化细胞房、动物房、国家标准的PCR实验室、蛋白病理综合实验室及千余平方的GMP洁净厂房等，并与国内外知名医学院校和科研机构建立了良好的合作关系，先后主持了教育部产学研项目和广东省、广州市创新基金项目，并获得广东省科学技术厅、广东省财政厅、广东省国家税务局、广东省地方税务局联合认定的高新技术企业。
维伯鑫生物科研团队具有丰富的科研经验，立足于生物医学领域，以客户需求为导向，为广大科研工作者建立了实验方案评估和优化、动物实验、细胞实验、基因水平实验、蛋白质水平实验、整体课题协作服务等平台。多年来，维伯鑫生物秉承“专业、专注；精细、精确”的服务态度协助广大科研工作者完成了数百项国家自然科学基金、省自然科学基金及各市、地区基金项目，为客户了提供最佳的实验设计优化服务和专业的实验解决方案，帮助科研工作者缩短科研周期、节省实验成本，使客户的科学研究具有持续性，广受好评。

服务流程：                                                                  

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