TALEN靶向基因敲除-基因剔除和基因敲除

TALEN (transcription activator-like (TAL) effector nucleases)靶向基因敲除技术是一种崭新的分子生物学工具，现已应用于植物、细胞、酵母、斑马鱼及大、小鼠等各类研究对象。研究发现，Xanthomonas TAL蛋白核酸结合域的氨基酸序列与其靶位点的核酸序列有较恒定的对应关系。研究者们利用来自Xanthomonas TAL的序列模块，构建针对任意核酸靶序列的重组核酸酶，在特异的位点打断目标基因，敲除该基因功能。成功解决了常规的ZFN方法不能识别任意目标基因序列，以及识别序列经常受上下游序列影响识别特性的问题，使基因敲除变得简单方便，不再是您实验中的障碍。  

技术特点：
1、无基因序列、细胞、物种限制。实验周期短。
2、整个实验简单准确，成本低。
3、成功率可达90%以上。
4、毒性低、脱靶情况少。
5、TAL的核酸识别单元与A、G、C、T有恒定的对应关系。
6、靶序列识别模块不受上下游影响，特异识别并打断基因组中的任意靶序列。
7、成对的TAL识别模块保证了基因敲除靶点的准确性。
8、已经成功应用到了植物、大、小鼠、细胞、酵母及斑马鱼等各类研究对象。

与ZFN技术相比，TALEN技术的优势如下：

基本原理与基因敲除步骤
步骤一 TAL靶点识别模块构建
步骤二 构建Talen质粒对
步骤三 将TALEN质粒对共转入细胞中实现靶基因敲除
步骤四 目标基因敲除突变体筛选确证

验证实例：EGFP TALENs 敲除靶基因eGFP的表达： 共转染EGFP TALENs质粒和EX-EGFP-Lv105 (eGFP表达克隆)到6孔板中的HEK293T 细胞中。48小时后在显微镜下观察EGFP的表达水平。

公司介绍：    

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