双抗体ELISA夹心法(Sandwich ELISA)的原理是将特异性抗体（捕获抗体）结合到固相载体上形成固相抗体，然后加入待检样品，捕获抗体与待检样品的的抗原结合形成免疫复合物，洗涤后再加酶标记抗体（检测抗体），与免疫复合物中抗原结合形成酶标抗体-抗原-固相抗体复合物，加底物显色后，即可判断抗原含量，具有高灵敏度、高专一性，抗原无须事先纯化的优点。但捕获抗体与检测抗体必须精心选取，才可避免交叉反应或竞争相同的抗原结合部位。

单克隆抗体对定制服务流程（该流程为一般流程，如客户有特殊需求，可协商具体解决方案）：
 
阶段一：抗原制备
公司准备抗原，若客户提供抗原，需10-15mg高纯度蛋白质；
 
阶段二：单抗制备（1-140天）
0-60天： 持续免疫5只 Balb/c小鼠，间接ELISA测定血清效价，至效价足够高；
60-65天：融合小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞，获得需要的杂交瘤细胞。
65-90天：间接ELISA筛选阳性杂交瘤细胞并做亚克隆，提供10株阳性细胞上清给客户，供客户筛选，所有阳性克隆可保存2周左右。
90-120天：对客户选出的阳性杂交瘤细胞做第二次亚克隆，保证细胞株的纯度和稳定性，如有必要可增加亚克隆次数。对筛选出的阳性杂交瘤的单克隆抗体进行亚型鉴定，扩大培养客户确认的阳性克隆细胞。
120-140天：将扩大培养的阳性杂交瘤细胞制备腹水，并纯化抗体1-2mg。
 
阶段三：单抗配对（140-180天）
140-150天：对纯化抗体做生物素或过氧化物酶（HRP）标记，然后对标记抗体进行分子筛层析纯化。
150-180天： 用棋盘式夹心ELISA筛选单克隆抗体对。未标记的抗体做为捕获抗体，标记抗体做为检测抗体，分组配对，做ELISA检测。设置合适的阴性对照，加入标准抗原后OD值明显升高的抗体对，即为配对抗体对。
 
阶段四：产品交付（180-210天）
180-210天：制备以下产品并发货：5mg捕获抗体，1mg标记的检测抗体，2-5株杂交瘤细胞，抗体配对相关数据

 

单抗对定制信息由武汉戴安生物技术有限公司为您提供，如您想了解更多关于单抗对定制报价、型号、参数等信息，欢迎来电或留言咨询。

注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途