重组人EPO N-联糖基化和O-联糖基化的全面表征

免疫球蛋白G(IgG)形态是许多蛋白质治疗药物的开发方向1 。与此同 时，各种重组人体激素和酶的问世也让许多高效的患者疗法得以实 现。例如，促红细胞生成素(EPO)α等刺激红细胞生成的治疗药物很 早以前就被用于治疗贫血症。这一增加患者红细胞数的疗法最早由 Epogen®公司商品化，该产品于1989年经FDA批准后在美国上市2 。时 至今日，随着生物制药行业的格局不断发展以及Epogen专利过期 (2013年)3 ，EPO药品成为了国际和国内生物仿制药市场的仿制对象。 

尽管促红细胞生成素α的一级结构相对较小，但它含有3个N-糖基化 位点和1个O-糖基化位点(图1)4 。由于糖基化的原因，尽管促红细胞 生成素α的蛋白质质量仅为18 kDa，但其分子量却达到30～40 kDa。 有趣的是，促红细胞生成素的糖基化与其功能和血清半衰期密切相 关。有研究表明，其糖基谱图中有两个属性与其体内活性(包括天 线化和唾液酸化作用)呈正相关关系5-7。因此，准确表征促红细胞生 成素治疗药物的糖基化非常重要。此外，研究促红细胞生成素的糖 基化还有另一项重要意义，那就是将详细的糖基分析作为开发有效 的促红细胞生成素生物仿制药的重要途径。