锘海LS18光片显微镜助力ProTracer技术发现成体肝细胞来源-荣登Science杂志

2021年2月26日，国际学术期刊 Science 在线发表了中国科学院分子细胞科学创新中心（生物化学与细胞生物学研究所）周斌研究组的研究成果“Proliferation tracing reveals regional hepatocyte generation in liver homeostasis and repair”。在该项研究中，他们建立了一种检测细胞增殖的新技术—ProTracer（Proliferation Tracer）。该技术具有长时间不间断检测细胞增殖的能力，可以特异性地标记某种特定细胞谱系的细胞增殖，并且实现了不牺牲样品直接活体检测细胞增殖，从多个维度刷新了细胞增殖检测的能力和范围，可以广泛应用于不同组织器官细胞增殖的检测，为发育生物学、肿瘤学、神经科学和再生医学等众多领域的研究提供强大技术支撑。研究人员利用ProTracer技术发现了成体肝细胞的来源，为肝脏再生及疾病临床治疗研究提供了新思路。

该文中的肝脏样本采用了SHIELD方法进行组织透明化，并使用锘海LS18光片显微镜对样品进行3D成像。

LS18 light-sheet microscopic image showing donut-like tdTomato signals in liver

SHIELD是基于CLARITY的改进方法，研究者从蛋白质构象保护出发，从上百种化学试剂中筛选出了P3PE，其环氧化作用很好的保护了组织内源性蛋白质、荧光蛋白，同时具有降低自发荧光等优异性能，SHIELD方法代替了原有的丙烯酰胺固定,摒弃了凝胶包埋的步骤，固定完的样品可直接进行透明化。SHIELD技术可实现脑、心、肝、脾、肺、肾、肠和脊髓等多种组织器官的透明化，比被动式透明化快一个数量级（数天VS数周）。对蛋白结构及荧光的保存可达数周的稳定性。

1.SHIELD固定试剂（锘海代理）

•  操作简便，无需包埋步骤

• 凝胶单体交联条件温和

• 优异的蛋白、核酸、荧光等的保护作用

2.SmartClear II Pro 全自动组织透明化系统（锘海代理）

•  一键式简易操作，快速有效组织透明化

• 保护组织结构以及荧光信号完整

• 适用于脑、心、肝、脾、肺、肾、肠和脊髓等多种组织器官的透明化
  

3.SmartLabel 主动式标记系统（锘海代理）

•  一键式简易操作，快速、均匀的免疫染色

• 保护组织结构以及荧光信号完整

• 适用于对完整大脑、心脏、脊髓等多种组织器官的免疫染色

锘海LS18光片显微镜

—— 专为透明化样品设计的高速高分辨三维荧光显微镜成像系统

针对大组织样品的3D荧光成像，采用与西湖大学高亮（平铺光片技术发明人）实验室共同研制的光片显微镜Nuohai LS 18，其运用创新的平铺光片技术，克服了传统光片显微镜中空间分辨率、光学层析能力和成像视野大小之间的矛盾，从而获得均匀高分辨率的3D荧光图像，广泛应用于脑科学、肿瘤学、药物研发、干细胞研究、组织胚胎学、组织病理诊断等各个领域。

适用于各种透明化样品：

•  水性透明化方法：SHIELD, CLARITY，CUBIC等

•  有机溶剂透明化方法：PEGASOS，3/i/uDISCO，AdipoClear，Visikol等

应用方向：

• 神经科学/发育生物学/肿瘤学/免疫生物学/病理学/生殖医学/动物器官3D成像（脑，肾，肺，骨骼，乳腺等）/组织工程学和类器官/药效评价

锘海一站式科研服务——让科研变得更简单

组织透明化技术和光片荧光显微技术的发展，使研究者能从宏观到微观对生物组织内部的结构及生理、病理特征进行观察和功能性分析。锘海生物科学仪器（上海）股份有限公司提供完整器官的组织透明化、组织免疫荧光染色、高分辨3D显微成像以及大数据分析一体化服务，旨在通过精准、快速、多样化的一站式科研服务为每一位生命科学工作者提供个体化/定制化的解决方案。

往期回顾：

LS18纪实：光片显微镜下的真相！

组织透明化染色、大组织3D荧光成像科研服务

一款适用于透明组织成像的多功能平铺光片显微镜