在有关转染的研究中，为了感染原代细胞和难感染的细胞系，研究者借助于病毒载体实现。由于慢病毒可以同时感染分裂和非分裂细胞、整合性以及免疫原性低等优点，目前在RNAi的研究中，基于慢病毒构建的shRNA被最广泛的使用。而在RNAi研究需要长期观察或者需要进行动物实验时，基于慢病毒构建的shRNA的优势更为明显。

实验流程：

1）根据目的基因相关信息（序列，序列号等），对每条目的设计3条siRNA序列，其中一条序列为阴性对照组；

2）根据设计好的siRNA序列，设计，合成两条互补的短片段的DNA；

3）对合成好的DNA片段进行稀释，退火，连接到线形化处理过的载体，转化，涂平板，过夜培养；

4）通过 PCR的方法筛选阳性菌落，进行测序，分析测序结果；

5）对于测序正确的重组质粒，提取和纯化高质量的不含内毒素的 siRNA病毒穿梭质粒；

6）利用构建好的质粒做转染实验，48小时后通过实时荧光定量和Western的方法分析目的基因，筛选出一条最有效的siRNA序列；

7）筛选出的高效重组载体和病毒包装质粒共转染 293T细胞，进行病毒包装和生产，收集病毒液；

8）浓缩、纯化病毒液，测定滴度。

慢病毒包装流程

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靶基因信息。

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慢病毒包装实验报告单，提供1*108TU/ml病毒（1 ml），对照病毒（200 μl）等。

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注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途