细胞转染及筛选稳定细胞系
定义：
细胞转染是指将外源分子如DNA、RNA等导入真核细胞的技术。
分类：
常规转染技术可分为瞬时转染和稳定转染两类。
瞬时转染的外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中，因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数，产生高水平的表达，但通常只持续几天，多用于启动子和其它调控元 件的分析。一般来说，超螺旋质粒DNA转染效率较高，在转染后24-72小时内（依赖于各种不同的构建）分析结果，常常用到一些报告系统如荧光蛋白等来帮助检测。
稳定转染的外源DNA可以整合到宿主染色体中。通常需要通过一些选择性标记，如新霉素抗性基因(APH；neo），潮霉素抗性基因（HPH），胸苷激酶（TK）等反复筛选， 得到稳定转染的同源细胞系。

筛选稳定细胞系的实验流程：
1. 筛选浓度测定：以10～14天细胞全部死亡的抗生素浓度为筛选浓度；
2. 细胞接种：转染实验前天接种细胞，各种细胞的平板密度依据各种细胞的生长率和细胞形状而定。进行转染当天细胞密度应达到60%～80%覆盖；
3. 细胞转染（脂质体）；
4. 利用质粒上含有的抗性选择进行筛选；
5. 鉴定筛选结果。        

   
相关要求（客户提供）：
1.生长状况良好的细胞株，细胞特性，培养条件及相关注意事项；公司可负责代购；
2.转染级别质粒，包括质粒大小，浓度，抗性等相关背景资料；
 
交付结果：
1. 具体实验报告（包括实验步骤和主要仪器及试剂说明）；
2. 目的质粒转染前后细胞培养图片和荧光图片；
3. 稳定筛选的细胞株，培养条件和培养图片；
4. 实验中没有用完的由客户提供的质粒等。
 

天津科斯莫生物科技有限公司：
       为各位新老客户提供高质，高效的技术服务！

科斯莫生物相关服务：
       MicroRNA相关服务、siRNA干扰、课题整体外包服务、基因克隆服务、慢病毒包装服务、腺病毒服务、稳定细胞株筛选服务、蛋白表达服务、抗体制备服务、DNA与蛋白相互作用研究、噬菌体展示技术服务、cDNA文库构建、干细胞研究、基金申请、标书撰写、专利申请、课题设计等

详情请联系我们：
电话：19902078713
邮箱：zxm@cosmobiolab.com  
科斯莫生物主页：www.cosmobiolab.com
地址：天津市滨海新区天津国际生物医药联合研究院

转染技术服务信息由天津科斯莫生物技术有限公司为您提供，如您想了解更多关于转染技术服务报价、型号、参数等信息，欢迎来电或留言咨询。

注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途