基化特异性的PCR（Methylation-specific PCR，MSP）
用亚硫酸氢盐处理基因组DNA，所有未发生甲基化的胞嘧啶被转化为尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不变；随后设计针对甲基化和非甲基化序列的引物进行PCR。通过电泳检测MSP扩增产物，如果用针对处理后甲基化DNA链的引物能得到扩增片段，则说明该位点存在甲基化；反之，说明被检测的位点不存在甲基化。
亚硫酸氢盐测序法（Bisulfite sequencing PCR，BSP）
用亚硫酸氢盐处理基因组DNA，则未发生甲基化的胞嘧啶被转化为尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不变。随后设计BSP引物进行PCR，在扩增过程中尿嘧啶全部转化为胸腺嘧啶，最后对PCR产物进行测序就可以判断CpG位点是否发生甲基化称为BSP-直接测序方法。将PCR产物克隆至载体后进行测序，可以提高测序成功率，这种方法称为BSP-克隆测序法。
 高分辨率熔解（High  Resolution Melt'' HRM）
   是一种最新的在表观遗传学中检测CpG位点的一种新技术。随着温度的升高，双链DNA（dsDNA）会分解为单链（ssDNA），HRM 技术就是根据PCR双链产物的分解（溶解）特性对其进行分析。在HRM 分析之前，必须扩增靶序列。应用针对亚硫酸氢盐转化后序列特异性的引物，而不是甲基化特异性引物进行亚硫酸氢盐转化后DNA 扩增。因此，引物应当包含若干转化后胞嘧啶，并应当在CpG 位点边上。以此确保只扩增亚硫酸氢盐转化后DNA，并在HRM 分析过程中区分甲基化和未甲基化CpG。
科研和临床应用
l 肿瘤的早期预测、分类分级、预后评估及多种疾病的分析。
l 转录水平分析：位于启动子区域的甲基化一般会抑制转录。
l 细胞凋亡等调控机制的研究。
操作流程：

提取高质量DNA

采用Qiagen Epitect Bisulfite Kit进行亚硫酸氢盐修饰

以修饰后的DNA做为PCR模板，进行MSP、BSP、HRM等分析

标本采集、保存、运输
l DNA样品，如需长途运输，可将检测合格的样品编号密封，注意切勿泄漏，冷冻运输。
l 组织和细胞样品，采样后立即用液氮速冻，于-80℃保存，冷冻运输。
l 血液样品：新鲜全血EDTA抗凝或枸椽酸钠抗凝，2-8℃48 h内运送到实验室，如不能立即运送，样品采集后于-20℃或-80℃保存，冷冻运输。
客户须知
l 细胞（≥1×IOn个）、组织(≥300 mg)、血液(≥1 ml)、血清(≥1.5 ml)等样品，基因组DNA（体积≥20川，；农度≥50 rigMI，用ddH20溶解DNA）。
l 客户需提供检测目的基因的名称、序列或者Genbank序列号。
达晖提供
报告单包括：详细的实验报告（仪器、试剂、引物序列、实验流程、甲基化程度分析等），检测方法、检测结果（MSP电泳图片、BSP测序结果或HRM熔解曲线）、检测结果解释（检测区域是否发生甲基化），举例如下：
检测方法：MSP法
检测结果：2%琼脂糖凝胶电泳图

DNA甲基化检测信息由广州达晖生物技术股份有限公司为您提供，如您想了解更多关于DNA甲基化检测报价、型号、参数等信息，欢迎来电或留言咨询。

注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途