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细胞迁移与侵袭实验/Transwell-细胞迁移和侵袭实验
参考报价: 面议 型号: 细胞迁移与侵袭实验/Transwell
品牌: 维伯鑫生物 产地: 中国
关注度: 6 信息完整度:
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                       细胞迁移与侵袭实验
细胞迁移与侵袭实验将Transwell小室放入培养板中,小室内称上室,培养板内称下室,上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔,将研究的细胞种在上室内,由于聚碳酸酯膜有通透性,下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞,应用不同孔径和经过不同处理的聚碳酸酯膜,就可以进行共培养、细胞趋化、细胞迁移、细胞侵袭等多种方面的研究。

服务内容和流程:
1)基质胶铺板:用BD公司的Matrigel 1:8(根据细胞产生mmp的量来决定)稀释,包被Transwell小室底部膜的上室面,置37℃30min使Matrigel聚合成凝胶。使用前进行基底膜水化。
2)制备细胞悬液:
①制备细胞悬液前可先让细胞撤血清饥饿12-24h,进一步去除血清的影响。但这一步并不是必须的;
②消化细胞,终止消化后离心弃去培养液,(用PBS洗1-2遍),用含BSA的无血清培养基重悬。调整细胞密度至5×105/ml。
3)接种细胞:
①取细胞悬液100µl加入Transwell小室;
②24孔板下室一般加入600µl含20%PBS的培养基,特别注意的是,下层培养液和小室间常会有气泡产生,一旦产生气泡,下层培养液的趋化作用就减弱甚至消失了,在种板的时候要特别留心,一旦出现气泡,要将小室提起,去除气泡,再将小室放进培养板;
③培养细胞:常规培养12-48h(主要依癌细胞侵袭能力而定)。24h较常见,时间点的选择除了要考虑到细胞细胞侵袭力外,处理因素对细胞数目的影响也不可忽视。
4)结果统计
①直接计数法,“贴壁”细胞计数,这里所谓的“贴壁”是指细胞穿过膜后,可以附着在膜的下室侧而不会掉到下室里面去,通过给细胞染色,可在镜下计数细胞;
②取出Transwell小室,弃去孔中培养液,用无钙的PBS洗2遍,甲醇固定30分钟,将小室适当风干;
③0.1%结晶紫染色20 min,用棉签轻轻擦掉上层未迁移细胞,用PBS洗3遍。400倍显微镜下随即五个视野观察细胞,记数。
实验周期:4周。

 
公司介绍:
       广州维伯鑫生物科技股份有限公司是一家从事生物医学科研技术服务和产品的高科技公司,坐落于广州科学城国家级科技企业孵化器内。搭建了完善的实验平台,包含2个标准化细胞房、动物房、国家标准的PCR实验室、蛋白病理综合实验室及千余平方的GMP洁净厂房等,并与国内外知名医学院校和科研机构建立了良好的合作关系,先后主持了教育部产学研项目和广东省、广州市创新基金项目,并获得广东省科学技术厅、广东省财政厅、广东省国家税务局、广东省地方税务局联合认定的高新技术企业。
       维伯鑫生物科研团队具有丰富的科研经验,立足于生物医学领域,以客户需求为导向,为广大科研工作者建立了实验方案评估和优化、动物实验、细胞实验、基因水平实验、蛋白质水平实验、整体课题协作服务等平台。多年来,维伯鑫生物秉承“专业、专注;精细、精确”的服务态度协助广大科研工作者完成了数百项国家自然科学基金、省自然科学基金及各市、地区基金项目,为客户了提供最佳的实验设计优化服务和专业的实验解决方案,帮助科研工作者缩短科研周期、节省实验成本,使客户的科学研究具有持续性,广受好评。
 
服务流程:                                                                   
 
维伯鑫生物科研平台包括:

 具体实验案例:
 



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