细胞代谢途径的抑制作用:将细胞养在芯片上完全贴壁后放在CO2孵箱中培养24-48小时至细胞达到80%融合度,然后进行测量。图中可以看到一个芯片/生物模块同时测量的3个参数,从上至下为:产酸率、呼吸作用、细胞贴壁电阻。第一个灰色区域显示的是适应期:细胞适应新的环境,包括新的培养基、低血清、灌注、高氧气浓度。 | |
从第一个白色区域到第二个灰色区域显示的是加入待测物质-细胞松弛素B,然后移除的过程,细胞生理代谢活动先受到了抑制,后来又恢复正常的过程。zei后一个白色区域显示的是细胞被去污剂Triton X-100杀死的变化过程,所有的生理学参数均降至0。细胞松弛素B能抑制葡萄糖跨膜转运,并抑制肌动蛋白形成微丝。产酸率的降低是由于细胞质中有效的葡萄糖含量的降低,而细胞贴壁电阻的降低表明细胞紧缩变圆(形态学变化),是由于肌动蛋白形成微丝的过程受到抑制造成的。而呼吸作用的增加是用于弥补由于糖酵解作用(对应产酸率,通过糖酵解作用产生ATP)降低而导致的能量不足。此试验表明细胞松弛素B对细胞的作用是可逆的,所有三个参数均可以恢复。在这个图中,我们可以清楚地观察到细胞松弛素B对细胞行为的影响。 | |
氧化磷酸化的解偶联作用:本实验结果表明,细胞代谢行为受到CCCP影响是与其浓度相关的。由于CCCP对的氧化磷酸化的解偶联作用,细胞可以使用氧气进行呼吸作用,但不能产生ATP/能量。细胞试图通过增加呼吸作用和氧气的消耗来产生ATP。通过三次加入CCCP后再更换新鲜培养基,细胞都出现生理状态回复的结果表明:大多数CCCP浓度下,细胞均可以恢复到正常的状态(100%加CCCP之前的水平)。 | |
zei高浓度CCCP-20μM的CCCP移除后,细胞并未恢复到100%正常状态,这是由于不可逆的线粒体损伤。该实验同时还测量产酸率和细胞贴壁电阻(没有显示在图中)。由于我们的系统具有6个平行的生物模块,所以可以同时进行不同浓度的三个参数的测量,全自动模式下,一天内就能得到所有的数据。 |
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