您还在使用传统的紫外分光光度计吗?是不是无法区准确区分样品中的DNA,RNA,蛋白提取的DNA,RNA,蛋白质量很少吗?接下来要进行qPCR或下一代测序等需要精密定量的实验方法吗?您要进行诸如转染等需要几天甚至几周才能获得结果的实验?
如果您对以上任一问题的回答是肯定,那么您就该选择Qubit荧光定量仪。与传统紫外分光法不同,Qubit 3.0采用专门的荧光检测技术和染料,特异性的区分出DNA,RNA,降解核酸,游离核苷酸及蛋白质,即便在低浓度下也具有极高的灵敏度和准确性。
选择性——采用荧光染料,特异识别并定量dsDNA, oligos,RNA,microRNA
准确——比传统紫外分光光度计更加准确
灵敏——zei低检测1uL样品,准确定量浓度仅为10 pg/uL 的DNA和12.5 ug/mL的蛋白
简单——易于使用的触摸屏界面和Android系统,全新的双核处理器加快计算速度
强大的双核处理器,5秒内快速准确地定量DNA,RNA和蛋白
zei低检测1μL样品(10 pg/μL DNA或12.5μg/mL蛋白)
zei多储存1,000 个样品结果,可通过U盘导出或直接与电脑连接
5.7英寸大尺寸彩色触摸屏,直观的导航按钮
个性化设置常规使用的应用,添加新的应用,甚至通过 MyQubit自定义创建新应用
Qubit®3采用更具人性化的界面,快速简单地获得实验结果。大尺寸的彩色触摸屏和Android系统,使得操作非常简单直观。浓度计算和设置都由仪器自动完成(图3)。Qubit®zei多可储存1000个样品结果,您可以通过U盘导出,也可以使用USB连接线直接与电脑相连。此外,在样品的延伸范围或超过试剂盒的检测范围,屏幕上均会有图形显示(图4)。
Qubit®试剂盒均采用相同的操作方案,只是孵育和读数稍有差异。其中DNA和RNA分析试剂盒仅需孵育2分钟,而蛋白分析试剂盒需要15分钟(图5)。Qubit®3.0荧光定量仪自动保存您的数据,您可以用USB数据线或U盘导出。除了常规的 dsDNA,oligos,总RNA,microRNA和蛋白质的分析试剂盒,在Ion Personal Genome Machine® (PGM™) 测序仪上进行测序之前,可以使用专门的Ion Sphere™ Quality Control Kit在Qubit®3.0上进行Ion Sphere™ 颗粒质量评估。
灵敏,准确,经济实惠 Qubit® 3.0荧光定量仪为全新升级的台式荧光计,配套高灵敏的Qubit®定量分析试剂盒,精确定量DNA,RNA和蛋白质浓度。采用专门研制的荧光染料,只有与样品中的靶分子特异结合时方可发射荧光信号,从而报告靶分子的浓度,因此这种特异性可以使您获得比传统紫外吸光法更加精确的结果。 Qubit® 3.0荧光定量仪主要特点包括: Qubit® 3.0 荧光定量仪尤其适用于: ■ 您的样品十分稀有且难以处理 ■ 提取后的dsDNA,oligos,RNA(包括microRNA)或蛋白质量很少 ■ 该样品将被用于成本昂贵的下游实验 ■ 这些样品将用于实时定量PCR(qPCR)或下一代测序法(NGS)等需要精密测定的实验 ■ 接下来要进行转染或其他应用,需要几天或几周才能获得结果的实验 ■ 您的样品制备过程复杂,需要激光显微切割(LCM)等特殊技术 |
Qubit®荧光定量仪的工作原理
灵敏,准确的生物分子定量
Qubit®荧光定量仪采用荧光染料与特异性的靶分子结合。这些荧光染料只有与这些靶分子结合时才会发射荧光信号,即使在浓度很低时(图1)。Qubit®3.0荧光定量仪比传统的紫外吸光法更加准确。以往的紫光吸光法不具选择性,测量260nm所有分子的吸光值——包含DNA,RNA,蛋白质,游离核苷酸或多余的盐离子。此外,紫外分光光度计的灵敏度不足,无法完成低浓度DNA和RNA的精确定量(图2)。使用Qubit®荧光定量仪,将大大提升您研究的准确性。因为Qubit®分析试剂盒里的荧光染料只与样品中的特异分子结合——DNA,RNA或蛋白,避免不准确测量带来的重复工作。
图1. Qubit® dsDNA HS 分析试剂盒的性能. The Quant-iT® dsDNA HS Assay具有0.2–100 ng线性定量范围,在样品中有同等量的RNA时选择性的结合dsDNA。 | |
图2. Qubit®定量检测平台的精确度和准确性。将浓度范围从0.01到10ng/uL的10份lambda DNA,在Qubit®荧光定量仪上使用 Quant-iT® dsDNA HS分析试剂盒按说明书操作进行检测。相同的10份lambda DNA样品采用NanoDrop® ND-1000分光光度计进行分析,将这种检测方法结果的准确性和精确度进行比较。每一个柱代表10份样品的平均值。误差线代表10个样品的标准差。列出的浓度为加入Qubit®分析管之前的起始样品中的DNA浓度。 |
图3. Qubit® 3.0荧光定量仪操作 | |
图4.Qubit®3.0荧光定量仪的标准曲线,显示样品浓度是处于延伸范围(extended range)或超出范围(不显示) |
■ 了解Qubit® 分析试剂盒
图5. Qubit®定量试剂盒操作流程. 与Qubit® 3.0荧光定量仪配套使用,Qubit®定量试剂盒提供无缝工作流程和简单的数据读取。每一个Qubit® 分析试剂盒提供浓缩的分析试剂,稀释缓冲液和预稀释的标准品。先用提供的缓冲液稀释试剂,加入样品(1-20uL之间的任何体积),读取Qubit® 3.0定量仪上的浓度即可。这些试剂盒均在常温进行操作,信号稳定时间长达3小时。 |
Qubit 4.0, Qubit 3.0,Qubit 2.0, Qubit 1.0, 核酸蛋白定量仪, 荧光计
Qubit 2.0荧光计采用专门研制的荧光检测技术,该技术采用只有与DNA、RNA或蛋白质结合后才发出荧光的Molecular Probes 染料。这些荧光染料只有与特异性的靶分子结合时,才能发出荧光信号,即使有游离核苷酸或降解核酸存在时亦是如此。由于Qubit技术只检测靶分子(而不是污染物)的浓度,因此这种特异性可以使您获得十分精确的结果。即便对于低浓度样品,Qubit荧光定量亦具有出众的DNA 和 RNA 定量特异性和灵敏度。
Qubit 2.0产品说明
选择性 —— 每个 Qubit 分析试剂盒都具有高灵敏度,可供特定分析RNA、DNA或蛋白质
灵敏度 —— 能精确可靠地定量浓度仅为 10 pg/μL的DNA和 12.5 μg/mL的蛋白质样本
简单直观 —— Qubit 2.0荧光计同样具有您所期待的高准确性,而且速度更快,使用更方便。
新特性包括:
宽大LCD彩色触摸屏
配备数据自动记录功能和 USB 端口,便于数据管理
方便的工作流程浏览导航
校准完成后显示标准曲线
NanoDrop及其它紫外分光光度计均采用紫外吸光度进行检测,它无法区分出DNA、RNA、降解核酸、游离核苷酸及其它杂质。 Qubit定量平台采用荧光染料检测特定目标分子的浓度。尽管紫外吸收定量法是zei常用的一种DNA或RNA定量方法,但其读数并不可靠且不准确 [1–4]。紫外吸光度法能够检测吸光度为 260nm的所有物质,包括 DNA、RNA、蛋白质、降解核酸和游离核苷酸。由于Qubit 2.0荧光计只检测目标分子,因此其定量结果一般低于A260读数,更为准确。
此外,分光光度计的灵敏度不足,无法完成低浓度DNA和RNA的定量。与采用NanoDrop分光光度计进行紫外吸收检测相比,Qubit 2.0荧光计能在较低的浓度范围内得出更准确、精密的结果 (参见下图)。鉴于荧光定量方法的准确度和精度,MIQE (评价qPCR实验和发表文章时所必需信息的zei低标准) 指南推荐采用荧光来定量核酸
Qubit 2.0荧光计的准确度和精度。根据标准试剂盒实验方案,用Qubit 2.0荧光计,采用Qubit DNAHS分析试剂盒重复10次测量浓度在0.01至10 ng/μL之间的lambda DNA。采用NanoDrop ND-1000分光光度计重复10次测量相同浓度的 DNA,比较结果的准确度和精度。各条线表示10次重复检测的平均值。误差线表示10次重复检测的标准差。标示的浓度是在Qubit 分析管中稀释前起始样本的DNA浓度。
Thermo Life Qubit 3.0荧光定量仪为全新升级的台式荧光计,配套高灵敏的Qubit®定量分析试剂盒,精确定量DNA,RNA和蛋白质浓度。采用专门研制的荧光染料,只有与样品中的靶分子特异结合时方可发射荧光信号,从而报告靶分子的浓度,因此这种特异性可以使您获得比传统紫外吸光法更加精确的结果。
Qubit3.0荧光定量仪主要特点包括:
强大的双核处理器,5秒内快速准确地定量DNA,RNA和蛋白
最低检测1μL样品(10 pg/μL DNA或12.5μg/mL蛋白)
最多储存1,000 个样品结果,可通过U盘导出或直接与电脑连接
5.7英寸大尺寸彩色触摸屏,直观的导航按钮
个性化设置常规使用的应用,添加新的应用,甚至通过 MyQubit自定义创建新应用
灵活选择操作语言,包括英语,简体中文,法语,西班牙语,德语,意大利语及日语
Qubit® 3.0 荧光定量仪尤其适用于:
■ 您的样品十分稀有且难以处理
■ 提取后的dsDNA,oligos,RNA(包括microRNA)或蛋白质量很少
■ 该样品将被用于成本昂贵的下游实验
■ 这些样品将用于实时定量PCR(qPCR)或下一代测序法(NGS)等需要精密测定的实验
■ 接下来要进行转染或其他应用,需要几天或几周才能获得结果的实验
■ 您的样品制备过程复杂,需要激光显微切割(LCM)等特殊技术
Qubit®荧光定量仪的工作原理
灵敏,准确的生物分子定量
Qubit®荧光定量仪采用荧光染料与特异性的靶分子结合。这些荧光染料只有与这些靶分子结合时才会发射荧光信号,即使在浓度很低时(图1)。Qubit®3.0荧光定量仪比传统的紫外吸光法更加准确。以往的紫光吸光法不具选择性,测量260nm所有分子的吸光值——包含DNA,RNA,蛋白质,游离核苷酸或多余的盐离子。此外,紫外分光光度计的灵敏度不足,无法完成低浓度DNA和RNA的精确定量(图2)。使用Qubit®荧光定量仪,将大大提升您研究的准确性。因为Qubit®分析试剂盒里的荧光染料只与样品中的特异分子结合——DNA,RNA或蛋白,避免不准确测量带来的重复工作。
图1. Qubit® dsDNA HS 分析试剂盒的性能. The Quant-iT® dsDNA HS Assay具有0.2–100 ng线性定量范围,在样品中有同等量的RNA时选择性的结合dsDNA。 | |
图2. Qubit®定量检测平台的精确度和准确性。将浓度范围从0.01到10ng/uL的10份lambda DNA,在Qubit®荧光定量仪上使用 Quant-iT® dsDNA HS分析试剂盒按说明书操作进行检测。相同的10份lambda DNA样品采用NanoDrop® ND-1000分光光度计进行分析,将这种检测方法结果的准确性和精确度进行比较。每一个柱代表10份样品的平均值。误差线代表10个样品的标准差。列出的浓度为加入Qubit®分析管之前的起始样品中的DNA浓度。 |
单个样品检测非常简单
Qubit®3采用更具人性化的界面,快速简单地获得实验结果。大尺寸的彩色触摸屏和Android系统,使得操作非常简单直观。浓度计算和设置都由仪器自动完成(图3)。Qubit®最多可储存1000个样品结果,您可以通过U盘导出,也可以使用USB连接线直接与电脑相连。此外,在样品的延伸范围或超过试剂盒的检测范围,屏幕上均会有图形显示(图4)。
图3. Qubit® 3.0荧光定量仪操作 | |
图4.Qubit®3.0荧光定量仪的标准曲线,显示样品浓度是处于延伸范围(extended range)或超出范围(不显示) |
适用于Qubit®荧光定量仪的试剂盒
Qubit®试剂盒均采用相同的操作方案,只是孵育和读数稍有差异。其中DNA和RNA分析试剂盒仅需孵育2分钟,而蛋白分析试剂盒需要15分钟(图5)。Qubit®3.0荧光定量仪自动保存您的数据,您可以用USB数据线或U盘导出。除了常规的 dsDNA,oligos,总RNA,microRNA和蛋白质的分析试剂盒,在Ion Personal Genome Machine® (PGM™) 测序仪上进行测序之前,可以使用专门的Ion Sphere™ Quality Control Kit在Qubit®3.0上进行Ion Sphere™ 颗粒质量评估。
了解Qubit® 分析试剂盒
图5. Qubit®定量试剂盒操作流程. 与Qubit® 3.0荧光定量仪配套使用,Qubit®定量试剂盒提供无缝工作流程和简单的数据读取。每一个Qubit® 分析试剂盒提供浓缩的分析试剂,稀释缓冲液和预稀释的标准品。先用提供的缓冲液稀释试剂,加入样品(1-20uL之间的任何体积),读取Qubit® 3.0定量仪上的浓度即可。这些试剂盒均在常温进行操作,信号稳定时间长达3小时。 |
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