ELISPOT读板仪

【 ELISPOT技术原理】

酶联免疫斑点技术( Enzyme Linked Immunospot Assay,简称 ELISPOT)是细胞免疫学研究中更敏感的检测方法,可以在

单细胞水平对抗体分泌细胞(ASC)及细胞因子(CK分泌细跑进行检测,比ELA和有限稀释法等具有更高的灵敏性,能从20

万-30万细胞中检岀1个分泌该蛋白的细胞。并且该方法能够对抗原刺激后的活细胞进行功能性检测,具有较高的特异性、

观可信度高,并且易操作,已被广泛用于分泌CK细胞检测或ASC测定中,在国内外免疫学界获得了广泛的应用

【EL|SPOT实验步骤】

淋巴细胞受到抗原刺激后局部产生细胞因子,此细胞因子被 ELISPOT板底PVDF膜上预包被的的特异性单抗捕获。去除细

胞后,被捕获的细胞因子与生物素标记的单抗结合,其后再与碱性磷酸酶或辣根过氧化物酶标记的亲和素结合。加底物显色

后,PVDF膜上出现紫色或红褐色的斑点表明细胞产生了细胞因子,通过酶联免疫斑点读板仪(EL| SPOT Reader)对斑点

的进行自动计数和分析