Licor Odyssey双色红外成像系统

双色红外激光成像系统

厂家：LICOR，Odyssey

应用：双色Western Blot，双色In Gel Western，双色EMSA，微孔板In-Cell Western，蛋白双向电泳扫描，蛋白芯片扫描。

原理：被检测蛋白的抗体标记了红外荧光染料，经过Western 试验被固定在杂交膜上。通过激光器的激发，荧光染料的激发光被光电二极管所检测到，通过软件计算，获得对应蛋白的检测值。

美国LI-COR公司的Odyssey双色红外荧光成像系统利用其zl的红外染料技术，两个独立的红外荧光通道检测荧光信号。该系统具有685nm和785nm激发波长的两个独立的红外激光器，分别激发两种红外荧光染料，产生720nm和820nm的发射光，然后由两个高灵敏度雪崩式光电二极管检测器同时检测荧光信号。

      一般的荧光染料不能有效地用于检测膜上的蛋白或者塑料培养皿中的蛋白，因为它们的激发和检测波长位于可见光谱区，易形成膜（NC膜、PVDF膜、尼龙膜）的高背景荧光干扰。而在红外波长区检测荧光信号，具有背景低，信噪比高的特点。因此，Odyssey可以用于检测膜上和微孔板上的蛋白或核酸，并对其进行精确的定量分析。

Odyssey成像原理 

直接成像：使用红外荧光染料标记的二抗，二抗孵育完成后，直接扫描成像；而ECL的方法，使用酶（HRP或AP）标记的二抗，孵育后，还必须加酶的反应底物进行酶动力学反应，再曝光成像或压片。

• 检测的信号强度和结合的二抗数量具有线性关系，保证定量的准确性

• 直接检测，无需加酶底物，非酶动力学反应

• 线性范围宽，高丰度和低丰度的蛋白能同时得到清晰、锐利的图像

• 灵敏度和化学发光的方法相当

Odyssey的特点

• 直接检测，操作简单：杂交以后直接扫描成像，无需胶片、暗房或复杂的染色及显色过程。        

• 双色成像：两种不同波长的红外染料对生物分子（蛋白或核酸）标记和同时检测。双色输出。两个靶分子同时检测，减少了工作量，而且杂交条件均等，便于两个数据的对比，可进行准确的量化分析。

• 高灵敏度：对于Western blots检测，灵敏度可达皮克级（pg）。

• 极宽的线性范围：在红外荧光区域，背景荧光信号大大低于可见荧光区域，因此，直接红外检测具有更宽的线性范围，可以得到清晰的、锐利的条带，一次杂交中的强信号和弱信号都可以清晰成像，从而提高了实验重复性和定量精确性。

• 实验成本低：Western成本低于常规化学发光，因为无需胶片和反应底物，而且二抗可重复使用进一步降低实验成本。

• 功能强大的软件系统：提供数据管理、定位蛋白大小和定量分析等完整功能

Odyssey的主要应用

双色Western blots分析：蛋白的研究不仅有量化的要求，修饰性研究是很重要的一块。Odyssey的双色功能极大方便了蛋白表达丰度和修饰化蛋白的研究。

双色 EMSA（电泳迁移率变化分析）：Odyssey 可以直接在凝胶上进行两个启动子的分析，不需要印迹到膜上，方便、快捷、无放射性危险。

700 and 800 Overlay

微孔板In-Cell Western分析：Odyssey可以直接在96或384孔板对细胞内目标蛋白进行精确定量，是高通量信号传导通路分析和药物筛选的zei佳选择。 

组织切片扫描分析 

      到2008年9月份，Odyssey红外荧光成像系统在国内装机将近120台，客户反响良好，而且应用该技术在CELL、PNAS、BLOOD等顶级刊物上均有文献发表。因此，Odyssey系统是一套非常成熟、有特色的蛋白研究平台系统。