赛默飞Bigfoot全光谱超高速流式细胞分选仪

创新点：

• 配置高达9激光60参数 • 第一款真正意义上的实时光谱流式分选仪，全光谱拆分及传统补偿调节模式可供选择 • 超高的分析和分选速度 • 强大的分选性能及灵活的分选模式 • 整合式II级生物安全柜及气溶胶管理系统 • 智能型全自动仪器校准及质控

赛默飞Bigfoot全光谱超高速流式细胞分选仪

高效、准确、安全、灵活——流式分选界天花板！

Bigfoot是全球第一台全光谱、超高速、高性能的流式细胞分选仪，具有强大的光谱解析和分选能力，是免疫学研究和生物医药开发领域的强有力工具。

其主要技术优势如下：

·       配置高达9激光60参数

·       第一款真正意义上的实时光谱流式分选仪，全光谱拆分及传统补偿调节模式可供选择

·       超高的分析和分选速度

·       强大的分选性能及灵活的分选模式

·       整合式II级生物安全柜及气溶胶管理系统

·       智能型全自动仪器校准及质控

概述

由细胞分选仪专家倾情打造，旨在拓展您的细胞分选应用

Invitrogen Bigfoot 全光谱超高速流式细胞分选仪旨在适应现有工作流程的同时扩展您的应用领域。配置高达9个激光器和60个检测器，既可以选择传统补偿模式进行数据分析，也可以切换成全光谱分析模式，以进行更精细的细胞亚群鉴定。整合式生物安全柜和气溶胶管理系统有助于保护您和您的样品。

Bigfoot的数据分析和分选速度极快，分析速率高达每秒100,000个事件，分选速率超过每秒70,000个事件，因此系统可以在8秒内完成96孔板分选，11秒内完成384孔板分选。Bigfoot 全光谱流式细胞分选仪功能强大，既可满足流式平台客户实验复杂、样品量大、应用范围广的需求，也可适应个人实验室对于仪器操作简便、自动化的需要；应用领域涵盖从荧光蛋白标记的细胞分选到深度免疫表型分析、基因组学、细胞和基因治疗研究，以及其他高性能、高通量的细胞分析和分选实验。

特点

内置整合式生物安全柜的高通量、高参数细胞分选

Bigfoot 全光谱流式细胞分选仪是由细胞分选专家专为当今最具挑战性的细胞分选应用而设计，它集高性能、安全性和易用性于一体，既能满足灵活的个人实验室的需求，也适合应用复杂的流式平台。全光谱解析可实现高参数、高通量的细胞分选，同时也提供传统补偿模式，以实现最大的灵活性。        

• 高性能和高通量

• 整合式生物防护与气溶胶管理系统

• 传统补偿或光谱解析两种模式可供选择

• 自动化的向导驱动式软件方便易用

• 满足各种细胞类型和应用的灵活性

• 流程化设计

• 适用于个人实验室或流式平台

高性能和高通量

Bigfoot 全光谱流式细胞分选仪的速度极快，分选速度超过 70,000 个事件/秒 (eps)，分析速度超过 100,000 eps。Bigfoot 能够 6 路分选到各种试管、4 路分选到 96 孔板、8 路分选到 384 孔板或直下式分选到 1536 孔板。 此外， 虚拟18路分选 允许研究人员从单个或多个样品中同时分选出多个细胞亚群。对于批量分选，InfiniSort 功能可实现按顺序执行多个试管或微孔板分选。

Bigfoot 全光谱流式细胞分选仪可在8秒内完成96孔板分选，在11秒内完成384孔板分选。    

Invitrogen Bigfoot 细胞分选仪 - 节省时间和更高通量

可配置、快速且设计用于高通量、 Invitrogen Bigfoot 多路分选仪在其自身的联盟中存在、比细胞分选仪快 10 倍。

微孔板分选不仅速度快，而且非常准确。利用 HRP 染色法，通过 TMB 底物的显色反应对分选液滴进行确认，实验证实单个液滴可以小体积分选到96孔 PCR 板或384孔 PCR 板内，且靶向分选的准确率达100%。我们的白皮书详细解释了为实现如此快速而准确的分选而开发的创新设计。

准确的液滴分选。图像显示了将悬浮于辣根过氧化物酶 (HRP) 溶液中的微球分选到含3,3’,5,5’-四甲基联苯胺 (TMB) 底物的微孔板中的液滴情况。  如果 TMB 变蓝，表明分选准确。（左）在96孔板中，A–D 行的孔分别收集到4、3、2和1个液滴，板孔的蓝色从浓变淡渐变可证明这一点。E 行的板孔中没有液滴（无显色）、而 F–H 行每孔均接收了1个液滴。（右）在384孔板中，奇数行（从 A 开始）收集到一个液滴而变蓝，而偶数行（从 B 开始）未收集到液滴，因此没有颜色。

下载关于高通量微孔板分选的白皮书

整合式生物防护与气溶胶管理系统

Bigfoot 全光谱流式细胞分选仪的一个特色是带整合式 II 类生物安全柜，它符合国家卫生基金会国际标准第49条所规定的人员和产品保护标准，其功能与 II 类 A2 生物安全柜相同。这款定制设计的安全柜可保护操作人员和样品免受气溶胶的损害和污染，且不会影响高参数细胞分选仪的性能或实验流程。单独的气溶胶管理系统符合 ISAC 关于细胞分选仪的指导原则。  

整合式生物安全柜和气溶胶管理系统

可移动窗格在提供封闭空间的同时可以方便地接触喷嘴和样品/分选区域，从而确保用户得到持续的保护。专用的气溶胶管理系统 (AMS)、HEPA 过滤器和软件提供防护警告，并在检测到仪器堵塞时自动增加液流系统的流量。

体贴周到的整合式生物安全柜设计方便仪器操作和简化用户的实验流程。可移动窗格可轻松升降，便于安全地接触上样区域或分选喷嘴。样品区域的内部控制面板可减少仪器操作人员频繁进出分选区域的需要。流经生物安全柜的空气可排入实验室，或者通过选配的罩棚进入外部排气系统。

Invitrogen Bigfoot 细胞分选机 - 生物安全

整合式生物安全柜有助于确保用户和样品的安全，并根据人体工程学优化了细胞分选实验流程。

下载关于流式细胞分选仪安全性的白皮书

传统补偿或光谱解析两种模式可供选择

Bigfoot 全光谱流式细胞分选仪的所有配置在作为传统细胞分选仪时都能发挥令人满意的功能，应用补偿模式来解决荧光染料间的溢漏问题。Sasquatch 软件可以构建并分析高达 60 x 60 补偿矩阵（使用所有60个检测器）的超多色实验方案。无需更改实验方案或分析方法，即可将现有的传统流式实验方案轻松迁移到 Bigfoot 仪器上运行，同时细胞分选应用具有高通量、高性能、易用性和安全性的优势。

此外，大多数 Bigfoot 配置均支持全光谱解析技术，可使用光谱解析而不是传统补偿模式来分析不同荧光染料发出的信号。 由于光谱解析技术可以对每个荧光染料的全光谱信号进行分析，所以可以在同一实验中使用具有相似信号的荧光染料，从而增加实验中可以同时检测的荧光通道数量。这对于深度免疫表型分析、生物标记物筛选以及其他多色应用尤其重要。

利用 Bigfoot 的全光谱解析配置，可以在同一台流式细胞分选仪上同时运行传统补偿和光谱解析两种模式，可以在需要进行多色实验时转换数据分析模式。

全光谱流式细胞术

全光谱流式技术的一个重要优势是在统一实验中可以同时检测到更多参数（荧光染料）。Bigfoot 流式细胞分选仪最多可配置 9 个激光器和 60 个检测器，从而支持在超多色流式实验方案中对细胞亚群进行光谱分析和分选。例如，该图显示了 56 个荧光染料的组合光谱特征图，不仅显示了每个荧光染料独特的光谱特征，还显示出可以添加其它荧光染料的位置。

光谱特征图。

在 Sasquatch (SQ) 软件中，您可以看到该实验方案中所选荧光染料面板的光谱图。该图清楚地显示了可以添加额外荧光染料而又不会与当前选择出现重叠的位置。通过在 Selected Fluorophores（选定荧光染料）列表中选定某种荧光染料，在光谱图中可以突出显示其特定的发射光谱。

全光谱解析的第二个优势是自发荧光可视为另一个荧光染料的光谱特征，从而去除自发荧光的干扰。与传统的流式细胞仪不同，自发荧光不会限制染料的选择，可根据实验需要进行评估或去除。

有关全光谱流式细胞术的硬件、光学系统、分析、优势和劣势的详细介绍，请参阅流式学习中心中的全光谱流式细胞术基础原理一文。 

实时光谱解析技术

某些全光谱流式细胞分析仪会在采集所有细胞后进行光谱解析，但这不能满足细胞分选的需要，因为细胞分选是在其数据采集和分析的过程中同时进行的。 Bigfoot 全光谱流式细胞分选仪可进行实时光谱解析，并将解析后的结果用于细胞分选。 大量平行的、流水线式数据处理模块消除了因数据解析速度跟不上细胞获取速度时造成的硬件丢失率。高分辨率的光谱解析算法也会提高分选细胞的纯度。

Invitrogen Bigfoot 细胞分选仪 - 光谱未混合

Invitrogen Bigfoot 光谱细胞分选仪利用专为细胞分选而设计的定制电子元件、能够实时对光谱不混合的数据进行分选。

光谱分选应用

Bigfoot 全光谱流式细胞分选仪尤其适合于超多色实验方案或高通量相关的分选应用。

免疫学

随着免疫学的发展，研究人员对主要免疫细胞、效应细胞和记忆细胞以外其他细胞亚群的关注度越来越高，随之免疫表型分析参数的数量也大大增加。

细胞和基因治疗研究

干细胞和 CAR-T 细胞等候选治疗细胞必须在操作前后进行高效分选

基因编辑

在进行编辑之前对目的细胞进行分选，以及收集通过 CRISPR 或其他方法编辑后的细胞群

基因测序

Bigfoot 流式细胞分选仪的细胞收集方式灵活，甚至可以将单个细胞直接分选到10X 基因组芯片上。

通过流式学习中心学习全光谱流式细胞术的基础知识和原理查看样品多色流式实验数据下载实时光谱分选白皮书下载高维光谱分选白皮书

自动化的向导驱动式软件方便易用

通过先进的自动化设计和软件向导，不同经验水平的操作人员都能自信地使用和控制该仪器。例如，液滴延迟时间——含有细胞的液滴与样品流之间的断点——对于细胞能否被准确分选至关重要。整合式控制系统可自动持续确保全天候液流的稳定性和准确的液滴延迟。

Invitrogen Bigfoot 细胞分选仪—易于使用

先进的自动化和直观的软件让拥有所有水平知识的操作员可以放心地使用 Bigfoot 光谱细胞分选仪。

为了简化实验流程并减少操作失误，Bigfoot 每天开机后即可运行自动化启动、流路校准、仪器质控和液滴延迟，简化分选前的仪器设置，使得系统准备就绪时即可运行实验。电子系统可根据喷嘴大小和压力值自动设置最佳的激光延迟时间。如果检测到气泡，系统会及时通知操作人员并停止分选以节省珍贵样品。整合式温控装置 (4–37 °C) 和涡旋仪可保持样品的完整性，而收集管温度控制可保持分选细胞的活性。

Sasquatch (SQ) 软件的用户界面直观、整洁，其内置实验流程简化了细胞采集、分析和分选步骤。先进的荧光染料选择器有助于设计传统补偿或全光谱实验方案，并会提示存在冲突的染料。实验向导可协助运行对照样品、发现潜在问题以及应用光谱解析算法。

软件分析功能包括图形叠加、彩色设门、反向设门、索引分选和各种统计图，并且软件可以生成与其他分析软件兼容的 FCS 文件。该软件还可生成关于系统使用、仪器质控、趋势分析和分选摘要的清晰报告。

系统运行状况检查

Sasquatch 软件可持续跟踪系统状态和运行状况。您可以通过仪器的工作站或远程监测和控制系统。自动化启动可使 Bigfoot 全光谱流式细胞分选仪在操作人员到达实验室之前自动启动并运行仪器质控方案。

分选预检

软件界面有一个包含分选前必须完成的所有任务的列表，并可以清晰显示出其运行状态。软件向导会引导您完成所有所需的步骤，以确保分选准备就绪。

摄像头监控

液滴摄像头可实时显示通过流动室的液滴。其他摄像头用于监控鞘液和分选液流。

复杂性指数

当向现有的流式实验方案添加荧光染料时，复杂性指数（最后一列）会评估解析这些荧光光谱特征的复杂性。理想情况下，每个添加的荧光染料只会最小程度地增加该指数值。

光谱相似性矩阵

SQ 软件可以计算出实验方案中所有荧光染料之间的光谱相似性，然后标记出可引起复杂性增加从而导致光谱解析难度增加的荧光染料。

流式配色工具

先进的在线配色工具可引导您完成所有采用传统补偿或光谱解析模式的流式实验方案的设计。该工具提供了一个简单的，定制化的界面，所有经验水平的操作人员都可以轻松使用。

下载使用 Sasquatch 软件进行实时光谱分选的白皮书

满足各种细胞类型和应用的灵活性

Bigfoot 系统提供从六个进样位置进行上样，可根据使用的适配器自动检测样品管尺寸（1.5、5 或 15 mL）。多位上样器只需一次或两次上样便可完成一个5到10色流式实验的对照样品上样。多管上样能力对于研究越来越常见的20色以上流式实验时尤为重要。所有与样品相关的硬件系统，包括多位上样器，都包含在整合式生物安全柜内，以确保最佳的安全性、效率和性能。

六位多样品上样器

Bigfoot 全光谱流式细胞分选仪有六个上样位置，您可以一次从进样器中对多个样品进行分选和分析。为确保准确上样，仪器会在上样器从当前样品移动到下一个样品时自动检测适配器类型。

一个上样管预留给校准微球，从而省却了每天从冰箱中取出微球并进行稀释这样一个准备日常质控品的步骤。机载清洗工作站可在8秒内完成一个完整的清洗和反冲循环，从而使样品之间的残留量极低。当样品量不足时，样品底部气泡检测器会在 50 毫秒内作出响应，停止进样，清洗进样针，并在无需用户介入的情况下移至下一个样品管。

在分选区，Bigfoot 全光谱流式细胞分选仪的空气激发感应装置确保对脆弱细胞的影响很小，在不降低得率的情况下最大限度地保证高速分选时的细胞活性。精确的液滴定向确保了单细胞分选的准确度、回收率和速度。 分选收集支架可兼容1.5、5、15和 50 mL 试管，多达1,536个孔的微孔板，显微镜载玻片，以及10x 基因组芯片。喷嘴更换向导简化了更换50、70、100、120和 150 μm 不同喷嘴吸头的设置。

流程化设计

Bigfoot 全光谱流式细胞分选仪专为不同研究领域的细胞分选应用而设计，在保证高配置、高性能的同时，最大程度地增加了灵活性、易用性以及简化您的实验流程。例如，校准微球预留于六位上样器中的其中一个，无需每天制备新的质控品。（大约每个月更换一次质控微球管即可。）在整合式生物安全柜内有宽敞的操作空间，用于放置样品架或板以及方便接触内置涡旋仪、样品管架和生物危害品袋。这使得实验人员可以在不破坏安全保障的情况下完成许多常规实验操作。

仪器内部安装了多个摄像头和传感器，可以监控系统运行状况，提供对所有硬件系统的反馈，以及记录仪器状态以主动进行故障排除。溶液检测摄像头可确保进样前已从样品管上取下盖子，从而避免进样针意外断裂。内置气泡检测会在样品管跑空前自动停止进样并通知操作人员，从而减少死体积。系统会追踪分选样品的体积，并可在装满时自动更换收集管。

下载 Bigfoot 全光谱超高速流式细胞仪分选仪产品手册

适用于个人实验室或流式平台

虽然 Bigfoot 全光谱流式细胞分选仪的设计旨在适合个人实验室的工作流程，但因其高配置、高性能、高速度、自动化的特点，它也非常适合作为流式平台的细胞分选主力。

眼见为实，在这段视频中，三位参与我们贝塔测试计划的流式平台负责人讲述了他们使用 Bigfoot 全光谱流式细胞分选仪的亲身体验。他们分享了 Bigfoot 系统相比于其他品牌的细胞分选仪在性能、自动化、易用性、占地面积小、噪音低和灵活性等方面的优势。“我称之为流式细胞仪中的瑞士军刀，”英国剑桥Babraham研究所的 Rachael Walker 博士说。

2021年 CYTO 大会上的 Bigfoot 网络研讨会

三位流式平台负责人——Rachael Walker（Babraham研究所）、Patricia Rogers（Broad研究所）和 Alan Saluk（Scripps研究所）——分别介绍了 Bigfoot 全光谱流式细胞分选仪成为其流式平台内主力分选仪器的经历。

尽管流式平台比较青睐自助式仪器，但终端用户可以亲自操作高端流式细胞分选仪并不容易。“学习[竞争对手的高端流式]仪器所需的时间和专业性大大限制了我们大多数用户亲自操作流式仪器的机会，”马萨诸塞州剑桥Broads 研究所的 Patricia Rogers 说。“他们根本不会像我们一样花费六个月的时间来学习如何进行光路校准和液滴延迟设置。”Rogers 补充说，通过将快速启动、自动化、软件向导和简单培训相结合，Bigfoot 全光谱流式细胞分选仪已证实高端细胞分选仪也可以由终端用户亲自操作，从而可以将仪器管理人员解放出来，专注于进行新技术和新实验的研究和开发。

“Bigfoot 分选仪的自动化启动、校准和质控流程令人印象深刻——从开始到结束只需17分钟。仪器的自动化启动每天至少可为我们节省一小时的时间。也就是说，我们平台可以增加一个小时的收费分选。这相当于我们每月可以增加20小时的仪器运行时间和更多收入。Bigfoot 流式细胞分选仪特别适合流式平台用户。”

Rachael Walker， 

流式平台负责人

英格兰剑桥郡Babraham研究所

仅供研究使用，不可用于临床诊断。