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纸层析法氨基酸的分离鉴定原理与方法

关键词: 纸层析 氨基酸来源: 互联网

一、实验目的 掌握氨基酸纸层析的方法和原理,学会分析待     测样品的氨基酸成分。 二、实验原理 纸层析是以滤纸为惰性支持物的分配层析。滤纸纤维上的羟基具有亲水性,吸附一层水作为固定相,有机溶剂为流动相。当有机相流经固定相时,物质在两相间不断分配而得到分离。 溶质在滤纸上的移动速度用Rf值表示: Rf=原点到层析斑点中心的距离/原点到溶剂前沿的距离 在一定的条件下某种物质的Rf值是常数。Rf值的大小与物质的结构、性质、溶剂系统、层析滤纸的质量和层析温度等因素有关。本实验利用纸层析法分离氨基酸。 三、实验器材 (1)大烧杯(5000mL):1只/组 (2)微量注射器(100mL):1只/      组。 (3)喷雾器:公用。 (4)培养皿:1只/组。 (5)层析滤纸(长22cm、宽14cm的新华一号滤纸):1张/组。 (6)直尺、铅笔:自备。 (7)电吹风:1只/组。 (8)托盘、针、白线:1套/组。 (9)手套:1双/组。 (10)塑料薄膜:公用。 (11)小烧杯:50mL,1只/组。 四、实验试剂 (1)扩展剂:将4体积正丁醇和1体积冰醋酸放入分液漏斗中,与5体积水混合,充分振荡,静置后分层,弃去下层水层。 (2)氨基酸溶液:0.5%的已知氨基酸溶液3种(赖氨酸、苯丙氨酸、缬氨酸),0.5%的待测氨基酸液1种。 (3)显色剂:0.1%水合茚三酮正丁醇溶液。                     实验试剂

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