溴化乙锭EB净化与处理方法
EB是我们从事生命科学尤其是分子生物学经常要接触的致癌性物质,且不好处理.现提供如下方法。
一、严禁随便丢弃。
因为EB是强致癌性,而且易挥发,挥发至空气中,危害很大。
二、废EB溶液的处理方法
1.溴化乙锭浓溶液(即浓度大于0.5mg/ml的溴化乙锭溶液)的净化处理
方法Ⅰ:用沙门氏菌微粒体测定法。本方法可使EB的诱变活性降至原来的1/200左右。
①加入足量的水使EB的浓度降低至0.5mg/ml以下:
②在所得的溶液中加入0.2体积的新配制的5%次磷酸和0.12体积的新鲜配置的0.5mol/L亚硝酸钠,小心混匀。切记:检测该溶液的pH值应小于3.0,市售次磷酸一般为50%溶液,具有腐蚀性。应小心操作。必须在临用前现用现稀释。亚硝酸钠溶液(0.5mol/L)的配法:用水溶液34.5g亚硝酸钠并定容至终体积500ml,现用现配。
③于室温温育24小时后,加入大大过量的1mol/L碳酸钠。该溶液可予丢弃。
方法Ⅱ:用沙门氏菌微粒体测定法检查,经用本方法处理后,可使EB的诱变活性降低至原来的1/3000左右。但也有报告称,在用净化溶液处理的空白样品中,偶尔有一些仍具有诱变活性。
①加入足量的水使EB的浓度降低至0.5mg/L以下;
②加入1倍体积的0.5mol/LKMnO4,小心混合后再加入1倍体积的2.5mol/LHCl小心混匀,于室温放置数小时;
③加入1倍体积的2.5mol/LNaOH小心混合后可丢弃该溶液。
2.EB稀溶液(如含有0.5ug/mlEB的电泳缓冲液)的净化处理
方法Ⅰ:
①每100ml溶液中加入2.9gAmberliteXAD-16,这是一种非离子型多聚吸附剂,可向Rohm&Haas公司购置;
②于室温放置12小时,不时摇动;
③用Whatman1号滤纸过滤溶液,丢弃滤液;
④用塑料袋封装滤纸和Amberlite树脂,作为有害废物予以丢弃;
方法Ⅱ
①每100ml溶液中加100mg粉状活性炭;
②于室温放置1小时,不时摇动;
③用Whatman1号滤纸过滤溶液,丢弃滤液;
④用塑料袋封装滤纸和活性炭, 注:用次氯酸(漂白剂)处理EB稀释液并不可取;
EB在262℃分解,在标准条件进行焚化后不可能再有危害性;AmberliteXAD-16或活性炭可用于净化被EB污染的物体表面。
三、EB接触物
1.如抹布,枪头。 一般回收至黑色的玻璃瓶中,定期进行焚烧处理。
2.电泳胶 胶里面痕量的EB没有问题,如果小于0.1%可以直接扔掉。而如果发红,即大于等于0.1%时应该放在生物危害柜中焚烧掉。
3.手套、设备等物品 放在医用垃圾中焚烧,如污染严重则用漂白剂处理。
EB的净化处理方法 小心:溴化乙锭是强诱变剂,并有中度毒性。取用含有这一燃料的溶液时务必戴上手套。