【求助】ELISA检测中的问题

参与者：zhou3303

请教各位大虾，小弟用LPS刺激中性粒细胞（2.5×106/ml）表达细胞因子IL-1，TNF-a，IL-6的实验中，ELISA检测上清后，空白孔（只有培养液和细胞）的值也较高，有50pg/ml，甚至有的有300pg/ml，而LPS刺激组的值也只有空白组的2倍多，不知是什么原因，望不佞赐教。

参与者：用心聆听

我在做跟你类似的实验，我测的是TNF-a，IL-6，IL-8，我查过相关文献，排除操作误差问题的话，要看你的作用时间是多久，因为细胞在不受刺激的情况下本身也会分泌这些细胞因子，而且会随着时间的延长有量的变化，而且你的LPS的浓度是多少?我的细胞上清的细胞因子的量就是呈现抛物线变化的.

参与者：lixia20052008

您好！我最近也想做IL-1和TNF-a，因为从来没做过这方面的东西，所以想请教一些问题，不知道是否可以?我的QQ是80753864，谢谢！

参与者：fushiyu139

其实有可能还有本底值，如果你用PBS代替上清液，结果也会出现显色反应。