我用的是DMEM低糖培养液，每次传代前，将培养液，PBS，0.25％的胰酶（没加edta）,放37度烤箱预热（此做法是减少4度的凉液体对细胞的刺激，以防细胞死亡）。

每次换液时，一定要烧培养瓶口，做好无菌观念。

先抛弃旧液，用PBS先冲净残留的血清，再加PBS用滴管轻轻的吹打细胞，将死细胞吹打掉。

加胰酶时注意：若用加edta的，记住了，在镜下看到细胞在收缩时，赶快吸出胰酶，加血清中止消化。血清可抑制胰酶的活性，但对edta无效。前后大概不到10秒。若用没有加edta的，时间要适当延长，看到细胞变为有立体感时，加血清，轻轻拍打，细胞就会散开。若团块大，可用滴管吹打。

动作一点要快，不能让细胞离开培养箱时间太长。